PRDM16、CIDE-B蛋白在脂肪組織中的表達及與肥胖的關(guān)系.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  為探討PRDM16、CIDE-B在成人脂肪組織中的表達水平及與肥胖的關(guān)系,本研究通過檢測PRDM16、CIDE-B蛋白分別在正常體重者和超重肥胖者的皮下脂肪和腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織中的表達水平,發(fā)現(xiàn)PRDM16、CIDE-B蛋白相對表達水平與超重肥胖的關(guān)系;同時檢驗PRDM16、CIDE-B基因啟動子甲基化水平與二者蛋白相對表達量的關(guān)系,探討PRDM16、CIDE-B基因甲基化與蛋白表達的關(guān)系。
  方法:
 

2、 選取醫(yī)院的腹部手術(shù)患者126例,男性25例,女性101例,排除孕婦、殘障或精神障礙者、繼發(fā)性肥胖者、惡性腫瘤患者及乙肝、艾滋病、結(jié)核等傳染性疾病患者。收集各研究對象的身高、體重、年齡、血糖值等生理生化指標(biāo)。采用我國肥胖診斷標(biāo)準,將研究對象分為正常體重組(18.5kg/m2  首先分別提取皮下脂肪和大網(wǎng)膜脂肪組織的總蛋白,然后采用蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù),其中PRDM1

3、6目的蛋白電泳采用8%分離膠,5%濃縮膠,CIDE-B蛋白電泳采用12%分離膠,5%分離膠,電泳過后轉(zhuǎn)膜2小時,恒壓設(shè)為80V,最后進行一抗二抗免疫反應(yīng),將配置混合好的ECL超敏發(fā)光液在凝膠成像系統(tǒng)中與免疫反應(yīng)后的PVDF膜接觸進行發(fā)光反應(yīng),將所得條帶圖進行拍照保存。采用Gel pro Analyzer軟件分析目的條帶的灰度值,每一個樣本的目的蛋白相對表達量以目的條帶的灰度值和相應(yīng)樣本GAPDH的條帶灰度值的比值表示。
  采用I

4、BM SPSS Statistics21.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析,兩組差異比較采用兩獨立樣本t檢驗或Mann-Whitney U檢驗,三組差異比較采用方方差分析或Kruskal-Wallis檢驗,計數(shù)資料采用χ2檢驗;各生理生化因素對蛋白相對表達量的影響程度分析采用多重線性回歸;皮下和大網(wǎng)膜脂肪組織目的蛋白的表達量差異采用配對t檢驗或Wilcoxon符號秩和檢驗;檢驗水準α=0.05。
  結(jié)果:
  1.配對樣本t檢驗結(jié)果顯

5、示,PRDM16蛋白在皮下脂肪組織中的相對表達量高于腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織,差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.001,P=0.319);CIDE-B 蛋白在皮下脂肪組織中的相對表達量高于腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.340,P=0.021)。
  2.皮下脂肪組織的PRDM16蛋白的相對表達量在正常組和超重肥胖組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.587,P=0.011),且正常組的相對表達量高于超重肥胖組。大網(wǎng)膜脂肪組織

6、的PRDM16基因的相對表達量在正常體重組和超重肥胖組之間的差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.671,P=0.097)。
  3.皮下脂肪組織的CIDE-B基因的相對表達量在正常體重組和超重肥胖組的差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.558,P=0.122)。大網(wǎng)膜脂肪組織的CIDE-B基因的相對表達量在正常體重組和超重肥胖組間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.253,P=0.026),且超重肥胖組的CIDE-B的相對表達量高于正常體重組。
 

7、 4.皮下脂肪組織中,收縮壓<140mmHg的CIDE-B基因的蛋白相對表達量小于收縮壓≥140mmHg的CIDE-B的蛋白相對表達量,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.319,P=0.025);大網(wǎng)膜脂肪組織中,舒張壓<90mmHg的CIDE-B基因的蛋白相對表達量小于舒張壓≥90mmHg的CIDE-B的蛋白相對表達量,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.290,P=0.024)。三組總膽固醇水平的CIDE-B蛋白相對表達量的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=

8、7.160,P=0.028),進一步多重比較結(jié)果顯示,3.0  5.各生理生化指標(biāo)與蛋白相對表達量的多重線性回歸分析結(jié)果顯示,BMI與皮下PRDM16蛋白相對表達量有關(guān)(β=-0.282, P=0.004),BMI水平低者的PRDM16蛋白表達量高于BMI水平高者。BMI與皮下CIDE-B蛋白相對表達量有

9、關(guān)(β=0.213,P=0.025),BMI水平高者的CIDE-B蛋白表達量高于BMI水平低者。
  6.皮下脂肪組織PRDM16蛋白相對表達量與大網(wǎng)膜PRDM16蛋白相對表達量呈顯著的正相關(guān)(r=0.482,P<0.001),皮下脂肪組織CIDE-B蛋白相對表達量與大網(wǎng)膜CIDE-B相對表達量呈顯著正相關(guān)(r=0.363,P<0.001)。而PRDM16與CIDE-B的蛋白相對表達量不存在線性相關(guān)(P>0.05)。
  7

10、.皮下脂肪組織中,PRDM16基因的 CPG_28位點的甲基化水平與蛋白相對表達量的關(guān)系存在統(tǒng)計學(xué)意義(β=-3.762,P=0.032),腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織中,PRDM16基因的CPG_28(β=-4.726,P=0.002)位點的甲基化水平與蛋白相對表達量的關(guān)系存在統(tǒng)計學(xué)意義。甲基化水平高的蛋白表達水平較低。
  結(jié)論:
  PRDM16、CIDE-B蛋白表達與成人肥胖存在一定的相關(guān)性,皮下脂肪組織中,正常體重者的PRD

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