1、膠原蛋白是動物體內重要的結構蛋白之一。由于具有獨特的三股螺旋結構，使其具備了優(yōu)良的力學性能和熱穩(wěn)定；同時，膠原蛋白具有良好的生物相容性和生物可降解性。這些性質決定了它在生物醫(yī)用材料中的廣泛應用前景。但是，近年來研究發(fā)現(xiàn)，來源于動物體的膠原蛋白存在若干隱患，如從動物體內提取的膠原蛋白可能攜帶該動物體內的某些病毒，這樣會帶給人類交叉感染；另外動物來源的蛋白在人體內可能會有免疫排斥反應，這些問題就限制了膠原蛋白的應用。 針對此問題，本

2、論文提出了一種非動物來源的合成方法，以避免上述問題的發(fā)生。該方法是利用基因重組技術及生物工程的手段，在膠原蛋白結構和功能關系的基礎上，設計了系列重組類人膠原蛋白，并利用大腸桿菌進行表達。由于原核生物--大腸桿菌缺少翻譯后的修飾作用，因此，合成的重組蛋白穩(wěn)定性相對較差。本研究中，我們在重組蛋白設計時，在其C末端引入了一段Foldon功能片段。該Foldon片段來自某一噬菌體纖維蛋白的N末端，該噬菌體纖維蛋白的組裝類似于膠原蛋白，而Fold

3、on區(qū)域的作用是促進該蛋白的組裝和穩(wěn)定其結構。通過基因重組和發(fā)酵技術，我們在大腸桿菌中成功地表達了四種具有不同分子量大小的重組類人膠原蛋白，MS結果顯示，蛋白的氨基酸組成與我們所設計的序列完全一致。FTIR結果顯示，類人膠原蛋白具有與天然膠原蛋白相同的結構特征，即形成三股螺旋結構；DSC和TG等分析結果顯示，通過Foldon片段的引入，類人膠原蛋白的熱穩(wěn)定性得到了明顯提高。同時，本研究對所獲得的重組類人膠原蛋白的生物相容性進行了分析。結

4、果顯示，類人膠原蛋白對人骨肉瘤細胞MG-63的生長具有明顯的抑制作用，而對小鼠的成纖維細胞L929具有很好的促進粘附和增殖作用，與天然膠原蛋白極其相似。 本論文所合成的類人膠原蛋白，一方面具有天然膠原的特性，即三股螺旋結構以及對正常細胞良好的生物相容性，同時，對骨肉瘤細胞的生長具有抑制作用，是由于三股螺旋中含有豐富RGD序列，它能競爭性的與腫瘤細胞膜上的整合素結合，從而抑制腫瘤細胞轉移，促進其凋亡。雖然其對MG-63的抑制機理有