1、垂體特異性轉錄因子1(POU1F1)是調控垂體GH、PRL、TSH-β亞基轉錄的重要反式因子，對動物正常的生長發(fā)育具有重要的生理意義。POU1F1的突變可能造成人類的綜合性垂體激素缺乏癥，引起早期組織器官發(fā)育不全，產生侏儒體態(tài)等臨床病癥。而POU1F1對豬的生長性狀同樣具有重要影響，被視為與生長相關的候選基因之一。 本實驗以大白豬(英系)、中畜黑豬、荷包豬、香豬為實驗材料，對POU1F1基因的DNA多態(tài)性進行PCR-SSCP和P

2、CR-RFLP檢測分析，同時提取實驗動物垂體的總RNA，通過實時定量熒光PCR對POU1F1、GH、PRL、TSH-β的mRNA表達水平進行定量分析，尋找多態(tài)位點和基因表達量間可能存在的相關。 本實驗共確定了在第一內含子(1515bp處)、第四外顯子(273bp處)和第四內含子到第六外顯子上的4個多態(tài)位點，并結合生產數(shù)據(jù)分析了上述位點的SNP與生長性狀關系。研究發(fā)現(xiàn)不同豬種POU1F1第四外顯子(273bp處)的PCR-SSCP

3、各基因型分布存在較大差異，大白豬和中畜黑豬群體中以AA基因型為主，有少量AB基因型個體；而香豬群體中以BB基因型為主，無純合AA基因型；荷包豬群體中三種基因型均有分布。該位點AA基因型和大白豬的背膘厚(P＜0.05)顯著正相關。 此外，本研究還驗證了第四內含子到第六外顯子上一段1747bp的RsaⅠ-RFLP和PstⅠ-RFLP。4個豬種在該區(qū)段的RsaⅠ的酶切多態(tài)性分析表明，RsaⅠ-RFLP位點的多態(tài)性在中外豬種中均有分布，

4、且各豬種均以AA基因型分布為主，同時散在AB和BB基因型分布。近一步研究顯示荷包豬BB基因型可提高斷奶前日增重，而中畜黑豬B等位基因的加入可能導致POU1F1表達量的提高。大白豬PstⅠ-RFLP顯示，該多態(tài)位點A等位基因雖與PRL表達量存在極顯著正相關(P＜0.01)，但是與生長性狀并無顯著性相關(P＞0.1)。 POU1F1的第一內含子1515bp處存在T→C的突變，該突變和屠宰前日增重相關系數(shù)為R=-0.6(P＜0.05)

5、，并且該位點的替換和屠宰前GH的表達量存在顯著相關(R=0.483，P＜0.05)，由此推論T→C的替換將導致GH的mRNA表達量升高，但在生長性狀上表現(xiàn)為屠宰前日增重降低。 對各個基因表達量間的相關分析表明，POU1F1和GH、PRL、TSH-β的表達量呈顯著正相關(P＜0.05)。 對豬POU1F1候選基因功能及生長性狀上的作用的研究，得到以下結果1.驗證了第四外顯子上的一個PCR-SSCP多態(tài)位點，進而發(fā)現(xiàn)該位點的

6、突變可能引起豬背膘厚和初生重的降低； 2.驗證了1747bp擴增片段的RsaⅠ酶切多態(tài)位點，進而發(fā)現(xiàn)該位點的突變可能造成POU1F1表達水平的提高，并提高豬的早期日增重： 3.驗證了1747bp擴增片段的PstⅠ酶切多態(tài)位點，在RNA表達上發(fā)現(xiàn)該位點的突變可能造成POU1F1和PRL的mRNA表達水平降低： 4.發(fā)現(xiàn)了第一內含子上一個新的T→C的替換位點，該位點的替換和GH的表達量存在相關，并對后期的體重增長產生