1、目的：將動脈粥樣硬化(Atherosclerosis, AS)患者和健康人作為研究對象，檢測兩種健康狀況的外周血中促炎性細(xì)胞因子和抑炎性細(xì)胞因子含量的變化，以及研究對象中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和Th17細(xì)胞含量的變化，研究在動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程中高遷移率族蛋白-1（high mobility group box1 protein,HMGB-1）和Th17/Treg的平衡與AS形成的相互關(guān)系，探討AS的致病因素，尋找可能存在的治療靶點，并為防治

2、動脈粥樣硬化以及動脈粥樣硬化所致的并發(fā)癥提供實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)。
　　方法：實驗設(shè)立對照組和AS組，檢測健康人和動脈粥樣硬化患者外周血中高遷移率族蛋白-1(HMGB-1)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（T regulatory cell,Treg）以及Th17細(xì)胞之間的含量變化，(1)采用 Ficoll密度梯度離心法分別將動脈粥樣硬化患者和健康人外周血分離得到人外周血單個核細(xì)胞（PBMCs）。(2)將分離出的單個核細(xì)胞采用磁珠分選法分選出調(diào)節(jié)性T

3、細(xì)胞（Tregs）。(3)用流式細(xì)胞術(shù)檢測磁珠分選所得CD4+T細(xì)胞和調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞的純度。(4)將不同濃度的 HMGB-1和 Treg細(xì)胞共培養(yǎng)，研究HMGB-1對Treg細(xì)胞的體外誘導(dǎo)分化，檢測封閉TLR4受體和不封閉TLR4受體時培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子TGF-β1、IL-10含量的變化。(5)用酶聯(lián)免疫吸附試驗法分別檢測動脈粥樣硬化患者和健康人血清中的細(xì)胞因子TGF-β1、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-23和HMGB-1

4、的含量。（6）用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。所得數(shù)據(jù)以x±s表示，兩組之間的均數(shù)比較用t檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　(1)AS患者外周血中的HMGB-1的含量比健康人外周血中的含量明顯增高。
　　(2)AS組外周血中的TGF-β1和IL-10含量比對照組明顯降低。
　　(3)AS組外周血中IL-6、IL-17A、IL-23的含量較對照組明顯增高。
　　(4)隨著HMGB

5、-1的濃度逐漸增加，封閉TLR4受體的CD4+T細(xì)胞分泌IL-10的功能增強，隨著HMGB-1刺激的濃度逐漸增加，未封閉TLR4受體的CD4+T細(xì)胞分泌IL-10的功能反而減弱。
　　(5)隨著HMGB-1的濃度逐漸增加，封閉TLR4受體的CD4+T細(xì)胞分泌抑炎性細(xì)胞因子TGF-β1的功能增強，而未封閉TLR4受體的CD4+T細(xì)胞分泌TGF-β1的功能減弱。
　　結(jié)論：動脈粥樣硬化患者外周血中促炎性細(xì)胞因子和抑炎性細(xì)胞因子與

6、健康人的水平存在較大的差異，本研究通過體外不同濃度的HMGB-1與CD4+T細(xì)胞共培養(yǎng)時，未封閉和封閉TLR4受體的CD4+T細(xì)胞分泌TGF-β1、IL-10的功能是不同的，隨著的HMGB1刺激濃度增加，未封閉TLR4受體的CD4+T細(xì)胞的分泌功能減弱，而封閉TLR4受體的CD4+T細(xì)胞分泌功能增強。AS患者外周血中HMGB-1、TGF-β1、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-23的含量與健康人之間差異較大，促炎性細(xì)胞因子水平明