1、1.目的:對(duì)6個(gè)短串聯(lián)重復(fù)序列(ShortTandemRepeats，STR)基因座在成都漢族群體中的遺傳多態(tài)性及其種屬特異性進(jìn)行研究，探討其在法醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用價(jià)值，并為法醫(yī)DNA分型提供新的候選STR遺傳標(biāo)記。 方法:用Chelex法從110名成都漢族無(wú)血緣關(guān)系個(gè)體的新鮮血以及14種常見(jiàn)動(dòng)物組織中提取DNA。從GDB數(shù)據(jù)庫(kù)中查出6個(gè)四核苷酸重復(fù)序列D4S2366、D4S2367、D6S474、D6S1281、D2S1396和D2

2、0S601，按數(shù)據(jù)庫(kù)提供的序列合成引物，經(jīng)PCR擴(kuò)增、非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳和硝酸銀染色技術(shù)檢測(cè)，對(duì)110名成都漢族無(wú)血緣關(guān)系個(gè)體的6個(gè)STR基因座進(jìn)行DNA分型，應(yīng)用POWERSTATS軟件對(duì)分型結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，獲得各基因座基因頻率及法醫(yī)遺傳多態(tài)性數(shù)據(jù)。應(yīng)用所合成的引物對(duì)14種常見(jiàn)動(dòng)物DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增和電泳檢測(cè)，對(duì)6個(gè)STR基因座的種屬特異性進(jìn)行研究。 結(jié)論:在成都漢族群體中D4S2366、D6S474、D6S1281

3、和D20S601基因座可作為法醫(yī)學(xué)個(gè)人識(shí)別和親子鑒定新的候選遺傳標(biāo)記，D2S1396和D4S2367基因座應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)時(shí)鑒定能力較差；D20S601有較好的種屬特異性，在法醫(yī)學(xué)研究中具有較大的應(yīng)用價(jià)值，其余5個(gè)短串聯(lián)重復(fù)序列種屬特異性較差。 2.目的:建立有效的毛發(fā)線粒體DNA(mitochondrialDNA，mtDNA)高變區(qū)Ⅰ(hypervariableregionⅠ，HVⅠ)異質(zhì)性DHPLC分析(DenaturingHi

4、ghPerformanceLiquidChromatography，DHPLC)的方法。 方法:從四川大學(xué)大學(xué)生群體中收集10名無(wú)血緣關(guān)系個(gè)體的頭發(fā)和唾液拭子樣本，酚-氯仿法提取mtDNA。根據(jù)PCR擴(kuò)增片段的位置，把mtDNA的HVⅠ區(qū)分為兩個(gè)基因座，分別稱(chēng)為HVIA和HVIB基因座。對(duì)兩個(gè)基因座進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并優(yōu)化反應(yīng)條件。熒光標(biāo)記末端終止法測(cè)定陽(yáng)性對(duì)照Y1樣本PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的mtDNA序列。應(yīng)用非變性聚丙烯酰胺凝膠垂直電

5、泳、硝酸銀染色技術(shù)檢測(cè)10名個(gè)體HVIA和HVIB基因座的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。在HVIA基因座，對(duì)Y1和Y2樣本的mtDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增；在HVIB基因座，對(duì)Y1和Y3樣本的mtDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物分別以?xún)煞N比例混合，共形成4個(gè)mtDNA池。用DHPLC方法檢測(cè)所有的mtDNA樣本池和10名個(gè)體的樣本，建立mtDNA異質(zhì)性DHPLC分析的方法。 結(jié)論:本課題成功建立了毛發(fā)mtDNA異質(zhì)性DHPLC分析方法，該方法有