1、目的：應用ATCC25177結核分枝桿菌菌種（凍干粉）在兔腰椎建立脊柱結核病模型，探討X線、CT（Computed tomography）、核磁共振（Magnetic resonance imaging，MRI）常規(guī)掃描、MRI彌散成像（Diffusion weighted imaging，DWI）、磁共振灌注成像（Perfusion weighted imaging，PWI）及組織病理學檢查在兔脊柱結核發(fā)病早期的影像診斷中的應用價值。

2、
　　方法：首先選擇實驗兔60只依據手術方法不同及注入試劑不同分為4組：A組25只：兔腰椎椎體內經手術鉆孔注入5.0mg/ml的結核菌液0.2ml；B組25只：椎間盤內直接注入5.0mg/ml的結核菌液0.2ml；C組5只：兔腰椎椎體內注入生理鹽水0.2ml；D組5只：兔腰椎椎間盤內注入生理鹽水0.2ml。（C組與D組為陰性對照）。選定的每只新西蘭大白兔腰6椎體作為實驗的觀察椎體，腰4椎體可作為自身對照椎體。術后1-8周時隨機處死

3、A、B兩組實驗兔行熒光定量PCR檢查、HE染色、膿液結核菌培養(yǎng)等組織病理學檢查與解剖學大體觀察；C、D兩組實驗兔在同樣時間段處死實驗兔行上述檢查。主要觀察指標：比較分析兩種手術方法造模的成功率、抗酸染色的陽性率；比較分析PCR熒光定量法在脊柱結核早期檢測的優(yōu)勢、與抗酸染色的陽性率比較；對結核病灶邊緣骨組織成骨細胞和破骨細胞計數及骨組織計量學分析。再根據實驗兔存活率最高且結核種植區(qū)椎體感染最優(yōu)的手術方法，建立影像學動物模型：選擇實驗兔40

4、只依據術中注入試劑不同分為2組：A組30只：兔腰椎椎體內經手術鉆孔注入5.0mg/ml的結核菌液0.2ml；B組10只：兔腰椎椎體內注入生理鹽水0.2ml；（B組為陰性對照）。選定的每只新西蘭大白兔腰6椎體作為本實驗的干預椎體，腰4椎體可作為空白對照椎體。術后4周、6周、8周時行X線檢查、CT檢查、MRI常規(guī)檢查及MRI-DWI彌散加權成像檢查及MRI-PWI灌注成像掃描。分析各影像學掃描方法在脊柱結核早期影像圖像中的意義及各掃描方法中

5、各個參數的意義，并將MRI-DWI彌散加權成像中的參數與MRI-PWI灌注成像的參數做相關性分析。比較各影像學檢查方法對脊柱結核早期評價中的優(yōu)缺點。
　　結果：通過兩組不同手術方法造模成功率的比較，A組腰椎側方入路于腰6椎體處鉆孔注入結核菌液的實驗兔手術成功率高于B組腰椎側方入路于腰5～6椎間盤處直接注入結核菌液的實驗兔；通過熒光定量PCR方法可以檢測出脊柱結核膿液中結核的特異性TB-DNA含量，并可檢出最低TB-DNA含量，且優(yōu)

6、于抗酸染色法；建立的實時熒光定量PCR的線性關系很好，Ct值與結核桿菌的DNA模板含量呈線性關系線性范圍為4×102～107Copies/mL，r=0.99503；通過組織病理學染色觀察到脊柱結核破壞早期，主要是以結核菌滲出期間椎體骨炎及增生期間的骨質破壞為主的組織病理學表現。通過影像學的實驗研究證明：A組術后8周時，三種影像學檢查方法對骨質破壞、椎旁膿腫、硬模、與脊髓受壓的診斷敏感性都有意義。術后8周時，MRI對脊柱結核造成的骨質破壞

7、與CT檢查的診斷敏感性比較，P值＞0.05，說明兩者在術后8周這個時間段時對診斷骨質破壞的敏感性上無明顯差異性，對于診斷椎旁膿腫與硬模、脊髓是受壓的敏感性 MRI＞CT＞X線；手術造模后第4周時 MRI及MRI-DWI就出現異常信號，且兔脊柱成像時DWI序列中研究b值在600s/mm2左右時可獲得較為清晰的圖像；第4、6、8周感染組病變椎體的ADC值高于正常椎體（P＜0.05）；通過對4類ADC圖像及ADC值的比較分析，得出：用8個b值

8、的DWI擬合出的ADC8b圖其信噪比最高，圖像質量最好；ADChigh值可以反映出病變椎體內部結核桿菌的活性；ADClow值隨著時間延長呈現逐漸增加的趨勢，說明在低b值的DWI上，病變椎體內部血流灌注的增加比水分子運動受限對該值的貢獻要明顯；ADCperf值隨著結核桿菌對脊柱椎體造成的破壞而呈現逐漸增大的趨勢；脊柱結核A組的實驗兔的CT值和破骨細胞數間存在負相關、骨小梁體積分數和破骨細胞數之間存在負相關。通過對MRI灌注成像的參數分析得

9、出：A組實驗組術后4、6、8周除達峰時間（TTP）隨著觀察時間的延長而降低以外，其他灌注參數都隨時間的延長而增加，增加幅度高于B組對照組，且除達峰時間（TTP）與DWI中的ADCperf呈負相關外，首過強化率（Efirst）、首過強化速率（Vfirst）、早期強化率（Ee）、早期強化速率（Ve）、信號最大強化率（Emax）、信號增強率（SER）、增強峰值（PH）、信號最大上升斜率（MSI）、排泄率（washout）都與ADCperf呈正

10、相關。
　　結論：通過在新西蘭大白兔腰椎局部種植結核分枝桿菌與腰椎間盤直接注入結核桿菌兩種手術方法的實驗研究，可以構建出兔脊柱結核模型，通過大體、解剖學、熒光定量PCR法及組織病理學檢查，證實建造模型成功。其中在新西蘭大白兔腰椎局部種植結核分枝桿菌脊柱結核模型的構建方法簡便且成功率較高，對脊柱結核早期的組織病理學研究等的動物實驗研究奠定了一定基礎。通過X線、CT與常規(guī)MRI及MRI-DWI、MRI-PWI成像的影像學檢查方法在診斷