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文檔簡介
1、多粘芽孢桿菌JW-725(Bacillus polymyxa JW-725)是本實驗室從西藏類烏齊協(xié)馬高山口草甸(海拔4671m)土樣篩選得到的,具有抑制植物病源真菌柑橘青霉菌(Penicillicum italicum)活性的拮抗菌株。 該菌株能利用碳源葡萄糖和可溶性淀粉;能利用氮源蛋白胨,黃豆粉等,不能利用無機氮源NHaCl和(NH4]~2S04。菌株在富含糖類碳源的培養(yǎng)基中,產生大量粘性物質,抑菌活性相對較低;而在富含蛋白
2、胨的培養(yǎng)基中,菌體生長良好且其發(fā)酵液具有較好抑菌活性。 中低溫度對發(fā)酵液抑菌活性影響不明顯,而50℃下培養(yǎng)的發(fā)酵液抑菌活性明顯降低。pH對發(fā)酵液抑菌活性有顯著影響,酸性條件下菌體基本不生長,基本沒有抑菌活性;該菌株對堿性培養(yǎng)基有較好耐受性,并且抑菌活性有部分提高。 以發(fā)酵液的抑菌活性為考察對象,5因素中培養(yǎng)基因素對發(fā)酵液抑菌活性的影響最大。利用正交試驗直觀分析法,得到菌株的最佳培養(yǎng)條件:LB培養(yǎng)基,初始pH9.0,通氣量
3、100mL,接種量10[%],發(fā)酵時間72h。 通過細菌細胞破碎和無菌發(fā)酵液濃縮試驗,初步定位抑菌物質為胞外物質。對發(fā)酵液抑菌物質進行初步分離,發(fā)現乙酸乙酯酸性萃取物有抑菌活性。 多粘芽孢桿菌JW-725菌株在和指示菌同步培養(yǎng)時,JW-725抑制菌絲的正常生長,并使一些新生菌絲頂端膨大;一些菌絲粗大,內容物聚集,形成較多液泡;一些菌絲空洞塌陷。當用其發(fā)酵液打孔法檢測時,抑菌圈出現“雙圈”現象,內圈病原真菌增生堆積,被抑制
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