高產多糖大球蓋菇菌株原生質體誘變選育及其抗氧化能力研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、大球蓋菇(Stropharia rugoso-annulata),屬擔子菌門(Basidiomycota),層菌綱(Hymenomtcetes),傘菌目(Agaricales),球蓋菇科(Strophariaceae),球蓋菇屬(Stropharia)。富含蛋白質、多糖、礦質元素、維生素等營養(yǎng)物質,其多糖具有預防冠心病、助消化、緩解精神疲勞等功效,對小白鼠S-180腫瘤及艾氏腹水癌抑制率達70%。 紫外線原生質體誘變技術是一種行

2、之有效的育種方法,至今仍廣泛應用。真菌多糖在國際上被稱為“生物反應調節(jié)物”,由于其獨特的生理活性,目前正成為國內外眾多學科領域研究的熱點之一。 本課題研究了大球蓋菇菌絲體原生質體的制備和再生條件,通過紫外線誘變原生質體技術選育出高產多糖的大球蓋菇菌株.并初步研究了透變菌株和出發(fā)菌株的抗氧化能力,得到以下結論: 大球蓋菇菌絲體原生質體制備的適宜條件為:在30℃、pH 5.5、1.5%溶壁酶條件下,以0.6 mol/L甘露醇

3、作穩(wěn)滲劑,酶解培養(yǎng)3 d的菌絲體2.5h,原生質體產量達到1.36× 10<'7>個/mL。適宜再生培養(yǎng)基組成為:馬鈴薯200 g,蔗糖20 g,蛋白胨2 g,酵母粉2 g,KH<,2>PO<,4> 1.5 g,K<,2>HPO<.4> 1.5 g,ragsO<,4>.7H<,2>O 1.5 g,維生素B<,1> 0.1 g,維生素Be 0.1 g,蒸餾水1000 mL,瓊脂20 g。適宜再生的穩(wěn)滲劑為0.6 mol/L甘露醇。上述條件

4、下,雙層平板法進行再生試驗,再生率達0.96%。 在15W紫外燈、照射距離為30 cm條件下,確定了大球蓋菇原生質體紫外線輻射至半致死率的照射時間為20s。以出發(fā)菌株為對照,根據拮抗反應和生長狀況篩選出100株大球蓋菇原生質體紫外線誘變菌株。以原始出發(fā)菌株為對照,從中篩選出10株大球蓋菇多糖含量高于原始出發(fā)菌株的誘變菌株,將10株誘變菌株及原始出發(fā)菌株分別連續(xù)傳代8次,從中篩選出1株多糖含量高且穩(wěn)定性好的誘變菌株,編號為093,

5、其多糖含量比出發(fā)菌株提高了25.3%。 以灌胃蒸餾水為對照,初步研究了大球蓋菇誘變菌株和出發(fā)菌株對小鼠全血谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidsade,GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量的影響。結果表明,小鼠全血.GSH-Px活性和SOD活性有所增加,分別在第15 d和第9 d達最高,誘變菌株菌粉制

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