1、創(chuàng)傷后應激障礙(PTSD)是指個體經(jīng)歷突發(fā)性、威脅性或災難性生活事件后，使個體延遲出現(xiàn)和長期持續(xù)存在的精神障礙。目前，臨床上PTSD的癥狀主要有重現(xiàn)創(chuàng)傷性體驗、情感麻痹冷漠、警覺性增高且易激惹、失眠、情緒起伏大等。PTSD不僅導致個體生活質量下降、社會職業(yè)功能受損，而且還經(jīng)常和物質濫用、抑郁障礙、焦慮障礙、恐懼癥等共病，給家庭及社會造成長期而持續(xù)的負面影響。因此，深入探討PTSD的發(fā)生機制、尋求有效的治療靶點，對于發(fā)展持久有效的預防和治

2、療措施具有重要的指導意義。p75神經(jīng)營養(yǎng)素受體(p75NTR)作為一種低親和力、多效能的神經(jīng)營養(yǎng)素受體，在調控細胞凋亡、軸突生長、細胞周期等方面具有重要作用。p75NTR的激活除可促進腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)與酪氨酸激酶B(TrkB)高親和性受體結合介導神經(jīng)元的再生，還可作為Nogo-66受體（NgR）的協(xié)同受體參與神經(jīng)元突起生長的抑制作用。臨床資料顯示，p75NTR可通過Caspase-9和pro-BDNF介導神經(jīng)元的凋亡，導致

3、PTSD患者海馬和杏仁核體積減??；另一方面，PTSD患者的創(chuàng)傷性記憶持久存在并易于激活，這種恐懼性記憶可通過p75NTR和pro-BDNF介導突觸可塑性的雙向調節(jié)來實現(xiàn)。因此，p75NTR作為一個新的治療靶點，可能參與PTSD的病理生理過程。本研究通過側腦室注射(ICV)前期我們通過基因工程方法制備的p75NTR胞外域（ED）與IgG Fc融合蛋白（p75NTR-ED-Fc）來拮抗內源性p75NTR的活性，并通過行為學鑒定和組織學檢測評

4、價治療效果，同時探討p75NTR在海馬神經(jīng)元凋亡及突觸改變中的作用及分子機制，為篩選治療PTSD患者的藥物提供可靠的新型靶點。
　　本研究主要內容包括：⑴將8周齡的雌性SD大鼠隨機分為Control組、PTSD+p75NTR-ED-Fc組、PTSD+NS組及PTSD組，采用單一連續(xù)刺激(Single-prolonged stress，SPS)法制備PTSD動物模型，對PTSD+p75NTR-ED-Fc組進行給藥干預，對PTSD+N

5、S組給予等量的生理鹽水。⑵采用曠場實驗、高架十字迷宮、Morris水迷宮實驗對實驗大鼠進行行為學測定，通過行為學數(shù)據(jù)比較各組之間的差異，初步評價治療效果。⑶采用HE染色、NISSL染色及Golgi-cox染色的方法觀察各組海馬神經(jīng)元及樹突棘的基本結構與形態(tài)。⑷采用免疫熒光染色的方法檢測與神經(jīng)細胞凋亡相關蛋白如 p75NTR、Bcl-2及Caspase-3的表達，檢測與神經(jīng)突觸可塑性相關因子如SynapsinI、pCREB及ROCK-2的

6、表達。評價治療效果的同時，探討PTSD發(fā)生機制。
　　本研究表明：①行為學結果：拒俘反應：PTSD組大鼠拒俘反應性得分顯著高于Control組（P<0.01），而PTSD+p75NTR-ED-Fc組拒俘得分顯著低于PTSD組（P<0.05）；曠場實驗：PTSD組與Control組的梳理次數(shù)、站立次數(shù)、靜止時間均有顯著性差異（P<0.01），PTSD+p75NTR-ED-Fc組大鼠在中央?yún)^(qū)域停留時間顯著高于 PTSD組（P<0.01

7、）；高架十字迷宮：PTSD+p75NTR-ED-Fc組前往開臂的次數(shù)與開臂停留時間均顯著高于PTSD組（P<0.01）；在水迷宮實驗：PTSD組與Control組在定位航行的第2、3、6天第一次尋靶潛伏期無顯著性差異，而PTSD組在第1、4、5天潛伏期顯著性延長（P<0.01），PTSD+p75NTR-ED-Fc組的與PTSD組在定位航行的第1、4、5天有顯著性差異；空間探索實驗中，PTSD+p75NTR-ED-Fc組與PTSD組在象限

8、停留時間與穿臺次數(shù)也有顯著性差異。上述結果表明，側腦室注射p75NTR-ED-Fc能在一定程度上降低攻擊行為和逃避行為、增加其活動能力、緩解焦慮狀態(tài)、增強學習記憶水平，對PTSD大鼠行為學具有一定程度的改善作用。②組織形態(tài)學實驗結果：Control組 CA3區(qū)細胞密集均勻分布，結構清晰，細胞大小均一，CA1區(qū)椎體細胞的基樹突數(shù)目較多，且輻射層中椎體細胞的頂樹突干均勻發(fā)出側枝；PTSD組 CA3區(qū)神經(jīng)細胞結構不清晰，細胞碎片多，CA1區(qū)椎

9、體細胞數(shù)目幾乎可數(shù)，分布稀疏，且只有少數(shù)椎體細胞著色；PTSD+p75NTR-ED-Fc組CA3區(qū)細胞密集，形態(tài)大小無明顯差異，結構較清晰，CA1區(qū)的輻射層中可見明顯的椎體細胞，分布均勻，分支夾角大，DG區(qū)可見多個大型苔蘚細胞，密集程度明顯比PTSD高。表明，p75NTR-ED-Fc對PTSD大鼠的行為學改善作用可能與海馬神經(jīng)元的保護作用及樹突棘數(shù)目及形態(tài)有關。③分子機制實驗結果：TUNEL凋亡檢測結果顯示，與Control組相比，PT

10、SD組海馬凋亡神經(jīng)元數(shù)量顯著偏高，且海馬體DG區(qū)Bcl-2、SynapsinI及pCREB表達水平顯著降低，而 p75NTR、Caspase-3及ROCK-2表達量則顯著上調。而與PTSD組比，PTSD+p75NTR-ED-Fc組海馬DG區(qū)被TUNEL染色標記的陽性細胞數(shù)量顯著降低（P<0.01），且 Bcl-2、SynapsinI及 pCREB的表達量明顯上調，而p75NTR、Caspase-3及ROCK-2的表達量則顯著下調。提示，