1、利用兼并引物分別擴(kuò)增出甜菜夜蛾的促前胸腺激素(pmthoracicotropic hormone，PTTH)和滯育激素(diapause hormone，DH)cDNA，克隆和測(cè)序結(jié)果顯示出PTTHcDNA包含一個(gè)編碼226個(gè)氨基酸的開放閱讀框：信號(hào)肽、一個(gè)未知肽和PTTH。和其它已知物種的PTTH比較，甜菜夜蛾和夜蛾科昆蟲有較高的同源性，和其它昆蟲的相似性稍低，但是PTTH分子中的7個(gè)半胱氨酸殘基的位置是保守且一致的。用棉鈴蟲PTTH

2、抗體進(jìn)行整體免疫組織化學(xué)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)PTTH在甜菜夜蛾腦中的兩對(duì)神經(jīng)分泌細(xì)胞中表達(dá)。Northern雜交表明PTTH mRNA約1．2 kb，特異表達(dá)在腦組織。半定量RT-PCR檢測(cè)了PTTH在幼蟲期和蛹期的發(fā)育變化，顯示出PTTH表達(dá)和蛻皮變態(tài)有密切的關(guān)系，暗示PTTH在甜菜夜蛾行使其生物學(xué)功能很可能也是通過刺激前胸腺合成和分泌蛻皮激素來完成的。從甜菜夜蛾咽下神經(jīng)節(jié)克隆到全長(zhǎng)為798bD的DH cDNA，該基因開放閱讀框編碼197個(gè)氨基

3、酸，包含DH、性信息素合成激活肽和3個(gè)功能未知的咽下神經(jīng)節(jié)神經(jīng)肽，它們的C末端都是保守的FXPR/KL(X=G、T、S)序列，和已知鱗翅目昆蟲DH cDNA有較高同源性，且組織結(jié)構(gòu)相同。Northern分析顯示DH mRNA特異表達(dá)于咽下神經(jīng)節(jié)，轉(zhuǎn)錄本為800bp，在幼蟲和成蟲中表達(dá)較高，可能和幼蟲發(fā)育和刺激成蟲分泌性信息素有關(guān)，暗示DH基因除了調(diào)節(jié)昆蟲滯育外，可能有其它的生理功能。滯育激素和促前胸腺激素在非滯育昆蟲甜菜夜蛾中均有表達(dá)，

4、在時(shí)空上顯出特定的表達(dá)模式，說明它們和生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)。 對(duì)棉鈴蟲滯育蛹的抗寒機(jī)理的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)海藻糖含量在滯育和非滯育棉鈴蟲蛹個(gè)體有顯著差異。海藻糖是主要的昆蟲血糖，海藻糖的合成依賴于6-磷酸海藻糖合成酶。據(jù)此，我們克隆了棉鈴蟲6-磷酸海藻糖合成酶cDNA，該cDNA全長(zhǎng)1827 bp，開放閱讀框編碼536個(gè)氨基酸的合成酶，用家蠶桿狀病毒體系表達(dá)6-磷酸海藻糖合成酶，成功獲得具有酶活性的蛋白。對(duì)棉鈴蟲不同發(fā)育時(shí)期的血淋巴進(jìn)行6-磷