1、微流控芯片(Microfluidic chip)是一種微型化、集成化的技術平臺。它能把整個生物或化學過程整合到一個只有幾平方厘米的芯片上，并且易于自動化操控。應用微流控技術進行實時現(xiàn)場生物標志物監(jiān)測是作為健康評估的一個有前景的技術。γ-H2AX熒光標記技術能夠檢測T淋巴細胞的輻射損傷，可以為實施現(xiàn)場評估輻射損傷提供重要的監(jiān)測靶目標。本研究為實現(xiàn)在芯片上自動化操控T淋巴細胞進行γ-H2AX免疫熒光標記的過程，研究了免疫磁珠結合淋巴細胞在芯

2、片上的驅動作用、γ-H2AX免疫熒光標記芯片的設計和優(yōu)化、利用人CD4細胞進行UVC紫外線輻射產(chǎn)生DNA的γ-H2AX熒光標記及其在芯片上實現(xiàn)特異性標記反應。
　　研究表明，利用永久磁鐵帶動2.8μm磁珠既滿足磁鐵帶動CD4淋巴細胞在芯片上的拖動，又不影響輻照產(chǎn)生的γ-H2AX相對熒光強度與輻照劑量的線性關系。本研究優(yōu)化了在芯片上實現(xiàn)CD4淋巴細胞γ-H2AX免疫的反應池和間隔池的數(shù)量分別為6個和5個，確立了各個反應池的反應試劑量

3、，確立了細胞與磁珠結合比為1/10，細胞上樣量為2×105。在芯片上通過永久磁鐵拖動結合了磁珠的淋巴細胞實現(xiàn)了對CD4淋巴細胞γ-H2AX免疫特異性熒光標記。通過對不同劑量(0、16、32、64J/m2)的UVC紫外輻照后的淋巴細胞的γ-H2AX相對熒光強度分析，獲得的相關系數(shù)為0.9517，證實利用該技術可以監(jiān)測到輻射損傷與輻照劑量的線性關系。
　　本研究可以為微流控芯片自動免疫熒光染色裝置以及便攜式細胞生物學實驗儀器的開發(fā)提供