1、目的：
　　 檢測(cè)沙眼衣原體小鼠肺炎菌株(Cm)呼吸道感染小鼠中Th17與Treg細(xì)胞的應(yīng)答水平：探討Th17和Treg細(xì)胞在Cm呼吸道感染中的作用及Th17與Treg細(xì)胞間的相互調(diào)節(jié)。
　　 方法：
　　 取6-8周雌性C57BL/6小鼠，鼻腔吸入40ul含1×103IFU的Cm，建立Cm感染小鼠肺炎模型。通過(guò)觀察Cm感染后小鼠體重變化、死亡率、肺組織Cm繁殖情況及肺病理學(xué)變化以確定小鼠感染Cm后的疾病狀態(tài)；在

2、感染后不同天數(shù)處死小鼠，制備脾細(xì)胞懸液，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Th17和Treg百分率；分離肺組織，利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)感染小鼠肺組織Th17和Treg的轉(zhuǎn)錄因子ROR-γt、FoxP3及相關(guān)細(xì)胞因子IL-17、TGF-β mRNA表達(dá)，探討Cm感染小鼠Th17與Treg細(xì)胞的免疫應(yīng)答水平。利用單克隆抗體體內(nèi)中和技術(shù)分別中和Cm感染小鼠體內(nèi)的IL-17與CD25，在感染后第7天處死小鼠，利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Treg及Th17細(xì)胞的應(yīng)答，利

3、用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)IL-17和CD25中和小鼠肺組織FoxP3、TGF-β及ROR-γt、IL-17 mRNA的表達(dá)，以探討Th17和Treg在Cm感染中的作用及兩者間的相互調(diào)節(jié)。
　　 結(jié)果：
　　 小鼠鼻腔吸入Cm誘導(dǎo)現(xiàn)典型的衣原體肺炎：小鼠體重下降、肺組織衣原體繁殖及大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。Cm呼吸道感染可誘導(dǎo)小鼠在感染肺組織及脾臟產(chǎn)生高水平的Th17和Treg應(yīng)答，以脾臟Th17與Treg細(xì)胞顯著擴(kuò)增；肺組織ROR

4、-γt、FOXp3及其相關(guān)細(xì)胞因子IL-17和TGF-β mRNA表達(dá)增高為特征。內(nèi)源性IL-17中和，小鼠呈現(xiàn)嚴(yán)重的疾病狀態(tài)；與給予PBS的對(duì)照組小鼠相比，內(nèi)源性IL-17中和小鼠脾臟Treg百分率及肺組織FOXp3、TGF-β mRNA的表達(dá)均無(wú)明顯變化。與給予PBS的對(duì)照組小鼠比較，內(nèi)源性CD25中和小鼠亦顯示嚴(yán)重的疾病狀態(tài)，但脾臟Th17百分率及肺組織ROR-γt、IL-17 mRNA表達(dá)均無(wú)明顯變化。
　　 結(jié)論：