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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
本研究通過(guò)觀察電針“百會(huì)”穴對(duì)阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)動(dòng)物模型APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶能力以及腦內(nèi)葡萄糖代謝情況的影響,探討電針改善APP/PS1小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的可能機(jī)制。
方法:
將30只12月齡雌性APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠,隨機(jī)分為模型組、百會(huì)組和非穴組,每組10只,另取10只同窩陰性野生小鼠為野生組。百會(huì)組電針百會(huì)穴,非穴組電針左脅下非經(jīng)非穴點(diǎn)
2、,每次30min,每天1次,每周5天,共治療4周,野生組和模型組不干預(yù)。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)觀察干預(yù)前后APP/PS1小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力;采用正電子發(fā)射斷層掃描技術(shù)(positron emission tomography,PET)觀察干預(yù)前后APP/PS1小鼠大腦18F-FDG攝取率;免疫組化和ELISA檢測(cè)小鼠海馬和皮質(zhì)區(qū)β-淀粉樣蛋白(β-Amyloid protein,Aβ)的表達(dá);蛋白免疫印跡法(Western Blot,W
3、B)檢測(cè)小鼠海馬和皮質(zhì)區(qū)腺苷酸活化蛋白激酶(Adenosine5'-monophosphate activated protein kinas,AMPK)、pAMPK、雷帕霉素靶蛋白(Mammalian Target of Rapamycin,mTOR)、pmTOR的表達(dá)。
結(jié)果:
(1)行為學(xué)結(jié)果顯示,在干預(yù)前,與野生組相比,其余各組小鼠逃避潛伏期均呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),同時(shí)百會(huì)組、
4、模型組及非穴組的逃避潛伏期和穿越平臺(tái)次數(shù)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);在干預(yù)后,百會(huì)組小鼠逃避潛伏期較模型組顯著性縮短(P<0.01),而非穴組小鼠逃避潛伏期與模型組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),同時(shí)百會(huì)組的穿越次數(shù)比起模型組和非穴組明顯增加(P<0.01)。
(2) Micro PET/CT成像結(jié)果顯示,在干預(yù)前,與野生組相比,其余各組小鼠海馬區(qū)和皮質(zhì)區(qū)18F-FDG攝取率均呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0
5、.01),模型組、百會(huì)組和非穴組小鼠18F-FDG攝取率沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在干預(yù)后,百會(huì)組小鼠海馬區(qū)和皮質(zhì)區(qū)18F-FDG攝取率高于模型組(P<0.01);非穴組小鼠海馬區(qū)和皮質(zhì)區(qū)18F-FDG攝取率與模型組小鼠相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
(3)電針“百會(huì)穴”對(duì)APP/PS1小鼠腦內(nèi)Aβ沉積結(jié)果顯示,與野生組小鼠相比,模型組小鼠海馬區(qū)Aβ沉積明顯增加(P<0.01);與模型組相比,百會(huì)組小鼠海馬區(qū)Aβ沉積
6、明顯減少(P<0.05);非穴組與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
(4) ELISA檢測(cè)Aβ1-42結(jié)果顯示,與野生組相比,模型組皮質(zhì)中Aβ1-42含量升高有顯著性差異(P<0.001),同時(shí)百會(huì)組小鼠Aβ1-42水平顯著性低于模型組和非穴組小鼠(P<0.01&P<0.05)。在海馬區(qū)同樣觀察到在干預(yù)后,百會(huì)組中Aβ1-42水平較模型組顯著性下降(P<0.01)。
(5) Western blot結(jié)果顯示,
7、與野生組相比,模型組小鼠海馬和皮質(zhì)區(qū)的pAMPK的表達(dá)與其總蛋白AMPK的比值明顯降低(P<0.05),與模型組相比,百會(huì)組小鼠海馬和皮質(zhì)區(qū)pAMPK的表達(dá)與其總蛋白AMPK的比值明顯增加(P<0.05);與非穴組相比,百會(huì)組小鼠海馬和皮質(zhì)區(qū)pAMPK蛋白的表達(dá)與總蛋白AMPK的比值明顯增加(P<0.05)。與野生組相比,模型組小鼠海馬和皮質(zhì)區(qū)pmTOR與mTOR的比值增加(P<0.05);與模型組和非穴組相比,百會(huì)組pmTOR與mTO
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