高粱轉(zhuǎn)錄因子SbbHLH1及SbRAP調(diào)控木質(zhì)素合成代謝作用機(jī)理的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、近兩年國(guó)際石油市場(chǎng)低迷,但這并不意味著能源危機(jī)得到緩解。從長(zhǎng)遠(yuǎn)來(lái)看,煤炭、石油等傳統(tǒng)化石燃料必將耗盡枯竭,因此尋找可持續(xù)的、低排放的新能源成為當(dāng)今世界各國(guó)共同面臨的迫切需要解決的重大問(wèn)題之一。生物乙醇具有綠色環(huán)保、可再生的優(yōu)點(diǎn),是一種合適的新一代能源,以木質(zhì)纖維素為生產(chǎn)原料的生物乙醇技術(shù)正日益受到重視。
  木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)復(fù)雜,包括纖維素、半纖維素和木質(zhì)素3個(gè)組成部分,其中用于發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的纖維素被半纖維素與木質(zhì)素緊密包圍,導(dǎo)致利

2、用纖維素物質(zhì)的效率降低。通過(guò)基因工程改變木質(zhì)素合成途徑中主要基因的表達(dá)來(lái)調(diào)控木質(zhì)素的生物合成、降低木質(zhì)素含量、提高纖維素的含量已成為改良生物乙醇生產(chǎn)技術(shù)的可選擇方法之一。本文通過(guò)對(duì)調(diào)控高粱木質(zhì)素生物合成途徑的轉(zhuǎn)錄因子SbbHLH1以及SbRAP進(jìn)行研究,了解其在木質(zhì)素生物合成中的功能和作用機(jī)制,為今后利用基因工程技術(shù)降低木質(zhì)素含量創(chuàng)造條件。
  通過(guò)前期研究及文獻(xiàn)報(bào)道,推測(cè)SbbHLH1可能會(huì)與其它bHLH形成異二聚體及與WD40

3、蛋白、MYB蛋白等發(fā)生互作,形成蛋白復(fù)合體。構(gòu)建酵母雙雜交載體,利用酵母雙雜技術(shù)從木質(zhì)素、花青素等生物合成、調(diào)控基因庫(kù)中篩選SbbHLH1互作蛋白,發(fā)現(xiàn)SbbHLH1與AtTT8(bHLH蛋白)、AtPAP1(MYB75)、AtPAP2(MYB90)存在不同程度的互作,而與AtTTG1、AtAN11兩種WD40蛋白未發(fā)生互作,說(shuō)明SbbHLH1不與這兩種WD40蛋白互作,而與其它bHLH蛋白及MYB蛋白發(fā)生互作。其中AtTT8與AtPA

4、P1/AtPAP2及AtTTG1一起形成BMW蛋白復(fù)合體,是調(diào)控花青素生物合成最關(guān)鍵的蛋白復(fù)合體,這與在擬南芥中過(guò)表達(dá)SbbHLH1會(huì)導(dǎo)致黃酮類化合物生物合成的其他相關(guān)基因的表達(dá)都受到抑制的結(jié)果相關(guān)聯(lián)。AtPAP1(MYB75)在木質(zhì)素生物合成途徑中可能起抑制作用,擬南芥中過(guò)表達(dá)AtPAP1會(huì)導(dǎo)致木質(zhì)素含量降低,SbbHLH1能與它互作,尚不清楚二者結(jié)合會(huì)對(duì)木質(zhì)素合成起何種作用,這有待于進(jìn)一步深入研究。
  SbRAP屬于AP2/

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