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![二倍體馬鈴薯DM及幾個(gè)野生近緣種染色體識(shí)別和比較FISH的分析.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/11/8/88d30175-4bfa-4cdc-b7b0-6c8730f255e4/88d30175-4bfa-4cdc-b7b0-6c8730f255e41.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、馬鈴薯是世界上僅次于小麥、水稻的重要作物。雖然二倍體栽培種富利亞薯(Solanum phureja,2n=24)DM已經(jīng)完成測(cè)序工作,極大地推動(dòng)了馬鈴薯基因組研究。然而由于二代測(cè)序和組裝的局限性,我們對(duì)串聯(lián)重復(fù)序列在栽培馬鈴薯及其野生近緣種染色體上的位置、分布以及豐度等信息不完全清楚。此外,現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)染色體精確識(shí)別技術(shù)已廣泛在多物種中建立,相對(duì)其他作物,該技術(shù)在栽培二倍體馬鈴薯及其野生近緣種中還未建立。
本文利用12個(gè)來(lái)自
2、S.tuberosum已知連鎖群的BAC克隆,結(jié)合rDNA重復(fù)序列(5S rDNA和45S rDNA)、著絲粒重復(fù)序列(St18、St49、St57和St3-294)和亞端粒重復(fù)序列(CL14和CL34)作為探針,與DM有絲分裂中期染色體進(jìn)行熒光原位雜交,確定了這些重復(fù)序列在不同染色體連鎖群上的分布、位置和信號(hào)強(qiáng)度。建立了二倍體馬鈴薯DM染色體識(shí)別圖和遺傳連鎖圖的聯(lián)系。
結(jié)合以上重復(fù)序列在染色體上的分布特點(diǎn),選取一個(gè)著絲粒重復(fù)
3、序列(St3-238)、兩個(gè)rDNA重復(fù)序列(5S rDNA和45S rDNA)以及兩個(gè)亞端粒重復(fù)序列(CL14和CL34)作為探針并進(jìn)行多色熒光標(biāo)記,在DM有絲分裂中期同一分裂相上進(jìn)行兩次連續(xù)的多色熒光原位雜交,讓二倍體DM的每一條染色體都帶上不同的信號(hào),達(dá)到精確識(shí)別DM的不同染色體的目的。建立了二倍體馬鈴薯一次性染色體辨認(rèn)技術(shù)。
此外,將已建立的DM染色體識(shí)別體系,推廣到其他幾個(gè)二倍體野生近緣種全套染色體辨認(rèn)工作和比較FI
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