1、目的：
　　觀察酸中毒（pHex6.8）對(duì)大鼠離體冠狀動(dòng)脈（coronary artery, CA）靜息張力的影響，并探討其作用機(jī)制。通過(guò)觀察Na+-H+交換體亞型1（NHE-1）抑制劑和Na+-HCO3-共同轉(zhuǎn)運(yùn)體（NBC）抑制劑對(duì)pHex6.8收縮大鼠離體CA的影響，探討酸堿轉(zhuǎn)運(yùn)體在酸中毒引起大鼠離體CA收縮中的作用；通過(guò)觀察氯通道阻滯劑（NPPB和NFA）及細(xì)胞外去除氯離子對(duì)pHex6.8收縮大鼠離體CA的影響，探討氯離子跨

2、細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)在酸中毒引起大鼠離體CA收縮中的作用；通過(guò)觀察Rho激酶（ROCK）抑制劑、蛋白激酶C（PKC）抑制劑和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）抑制劑對(duì)pHex6.8收縮大鼠離體CA的影響，探討蛋白激酶在酸中毒引起大鼠離體CA收縮中的作用。
　　方法：
　　1.將SD雄性青年大鼠（230~260 g）斷頭處死后，快速?gòu)男厍粌?nèi)取出心臟，置于4℃、pH7.40、95％O2+5%CO2飽和的生理鹽溶液（Physiological s

3、aline solution， PSS）中。在解剖顯微鏡下，用顯微剪和顯微鑷將大鼠冠狀動(dòng)脈（室壁支、室間隔支及前降支）快速分離干凈，游離出來(lái)，剪成約2 mm長(zhǎng)的冠脈血管環(huán)，固定于微血管張力記錄儀（Multi Myograph System-610M，DMT）。采用PowerLab微血管環(huán)張力系統(tǒng)，記錄大鼠離體CA血管環(huán)的張力。
　　2.分別觀察NHE-1選擇性抑制劑 HOE-642（30μmol/L）預(yù)孵和NBC抑制劑S0859（

4、100μmol/L）預(yù)孵對(duì)pHex6.8引起大鼠離體CA收縮的影響。
　　3.分別觀察氯離子通道阻滯劑NPPB（10、30、100μmol/L）和NFA（10、30、100μmol/L）對(duì)pHex6.8引起大鼠離體CA收縮的影響；分別觀察氯離子通道阻滯劑NPPB（10、30、100、300μmol/L）和NFA（10、30、100、300μmol/L）對(duì)KCl（60 mmol/L）引起大鼠離體CA收縮的影響；以及分別觀察NPPB（

5、100μmol/L）和NFA（100μmol/L）對(duì)血栓素A2類似物U46619（1μmol/L）引起大鼠離體CA收縮的影響。此外，觀察用L-天冬氨酸鈉等量代替細(xì)胞外PSS液中氯化鈉后，對(duì)pHex6.8、KCl（60 mmol/L）和U46619（1μmol/L）引起大鼠離體CA收縮的影響。
　　4.分別觀察ROCK抑制劑Y-27632（3μmol/L）、PKC抑制劑Go6983（1μmol/L）和ERK抑制劑PD98059（10

6、μmol/L）對(duì)pHex6.8引起大鼠離體CA收縮的影響。
　　結(jié)果：
　　1.在靜息狀態(tài)時(shí)，pHex6.8引起大鼠離體CA張力升高，最大張力為（3.90±0.95） mN，相當(dāng)于KCl（60 mmol/L）最大收縮幅度的（105.07±10.65）%。
　　2. HOE-642（30μmol/L）使pHex6.8引起的大鼠離體CA收縮幅度降低（18.46±5.29）%（P<0.01），S0859（100μmol/L）

7、使其收縮幅度降低（14.90±3.24）%（P<0.01）。
　　3. NPPB和NFA均濃度依賴性（10、30、100μmol/L）地抑制pHex6.8引起的大鼠離體CA收縮，最大抑制百分比分別為（66.61±7.07）%（P<0.01）和（64.48±11.68）%（P<0.01）。NPPB和NFA均濃度依賴性（10、30、100、300μmol/L）地抑制KCl（60 mmol/L）引起的大鼠離體CA收縮，最大抑制百分比分別

8、為（83.51±3.13）%（P<0.01）和（52.37±12.31）%（P<0.01）。NPPB（100μmol/L）和NFA（100μmol/L）均可抑制U46619（1μmol/L）引起的大鼠離體CA收縮，其抑制百分比分別為（44.04±9.68）%（P<0.01）和（46.23±5.24）%（P<0.01）。用L-天冬氨酸鈉代替PSS溶液中的NaCl后，幾乎完全抑制pHex6.8引起的大鼠離體CA收縮（P<0.01），而對(duì)KC

9、l（60 mmol/L）和U46619（1μmol/L）引起的大鼠離體CA收縮無(wú)顯著影響（P>0.05）。
　　4. Y-27632（3μmol/L）、G?6983（1μmol/L）和PD98059（10μmol/L）均可抑制pHex6.8引起的大鼠離體CA收縮，其抑制百分比分別為（29.37±13.44）%（P<0.01）、（29.84±10.58）%（P<0.01）和（23.14±9.47）%（P<0.01）。
　　結(jié)論