1、近年來，關于腎癌的處理經歷很大變化，如對于局部腎癌，腎部分切除術即可達到滿意的臨床結果，而對于轉移性腎癌，則以血管內皮生長因子或雷帕霉素信號通路的靶向治療占主導。另外，以免疫檢測點為靶點的腫瘤免疫治療，正受到高度關注，細胞毒性T細胞相關抗原4(CTLA-4)阻斷劑作為此類療法的代表，其臨床研究結果顯示出較強的抗腫瘤能力。
　　石蒜堿(Lycorine)屬異喹啉類生物堿，提取自石蒜科植物，現有的研究證實其具有多種生物藥理活性，因近年

2、來許多研究表明其具有抗腫瘤作用，關于石蒜堿的抗腫瘤能力日益受到重視，其抗腫瘤機制包括:誘導細胞凋亡，細胞周期阻滯，誘導程序性壞死及抑制血管生成擬態(tài)等。然而，尚無關于免疫檢查點阻斷劑聯(lián)合石蒜堿對腎臟惡性腫瘤作用效應的研究。
　　因此，在本研究中采用熒光素酶報告基因技術標記及構建小鼠腎癌細胞:Renca-Luc，并以此細胞株建立免疫功能正常的小鼠原位腎細胞癌及肺轉移模型，通過IVIS2000動物活體熒光成像系統(tǒng)實現無創(chuàng)、動態(tài)監(jiān)測活體水

3、平下腫瘤的生長情況，從而了解免疫檢查點阻斷劑及石蒜堿對腎臟惡性腫瘤的作用效應，并探討石蒜堿是否可提高CTLA-4阻斷劑的治療效應，降低其不良事件的發(fā)生率。
　　通過體外實驗，明確鹽酸石蒜堿可有效抑制多種人源腎癌細胞株及鼠源腎癌細胞Renca的增殖能力，而且Renca最為敏感;同時可抑制Renca的遷移及侵襲能力。為進一步探討其作用機制，檢測經鹽酸石蒜堿作用后Renca各細胞周期的分布情況，結果顯示sub-G1期細胞含量明顯增高，伴

4、隨G2/M期細胞含量降低，且呈濃度相關。免疫印跡技術檢測細胞周期相關蛋白的表達情況后，得出鹽酸石蒜堿可抑制Renca的細胞周期相關蛋白cyclin D1，cyclin D3及CDK2等表達。隨后通過穩(wěn)定表達熒光素酶的小鼠腎癌細胞(Renca-luc)構建小鼠原位腎及肺轉移模型確認，聯(lián)合應用鹽酸石蒜堿及免疫檢測點阻斷劑可產生增強的抗腫瘤效應。除此之外，在本研究中，首次報道聯(lián)合應用鹽酸石蒜堿及免疫檢測點阻斷劑可以通過下調T調節(jié)細胞伴隨效應T