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文檔簡介
1、目的:通過檢測IL-17(interleukin-17)在RA病情不同階段的表達水平,初步探討其在RA發(fā)病機制中的作用及與疾病活動度的關系,為RA的治療提供新的線索。
方法:
1、半定量RT-PCR法:根據(jù)1987年ACR的RA分類診斷標準,將入選對象分為3組:RA活動組(15例),RA非活動組(12例),正常對照組(10例),分別提取各標本的外周血總RNA,用半定量的反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應方法(RT-PCR)測
2、定各組IL-17mRNA的表達水平,并比較其與RA患者臨床常見指標之間的相關性:如患者年齡、類風濕因子RF-IgA、RF-IgG、RF-IgM和抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(ACCP)的滴度,血沉(ESR)、C反應蛋白(CRP)、DAS28的水平。
2、ELISA法:根據(jù)1987年ACR的RA分類診斷標準,將入選標本分為RA活動組(30例)、RA非活動組(28例)、正常對照組(18例)。對3組采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA
3、)測定其血清IL-17的水平,并檢測RA組血清IL-17水平與部分實驗室指標間的關系。數(shù)據(jù)處理采用統(tǒng)計軟件SPSS17.0,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
結(jié)果:
1、RT-PCR結(jié)果:對3組數(shù)據(jù)作方差齊性的Levene檢驗,P>0.05,可認為3組數(shù)據(jù)方差齊,且3組間IL-17mRNA的表達量有顯著差異(P<0.01,方差分析)。其中,與正常對照組相比,RA活動組的IL-17mRNA的表達水平顯著升高(
4、P<0.01);RA非活動組的IL-17mRNA的表達水平也明顯升高(P<0.01);而RA活動組與非活動組之間的IL-17mRNA表達水平的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。將IL-17mRNA的表達水平與臨床常見指標作Pearson相關性分析,結(jié)果顯示IL-17mRNA的表達水平僅與ESR(P<0.05)、CRP(P<0.05)呈正相關關系,而與RF滴度、ACCP滴度、年齡、腫脹關節(jié)數(shù)、疼痛關節(jié)數(shù)、DAS28無關(P>0.05)。<
5、br> 2、ELISA結(jié)果:3組間年齡及血清IL-17水平均方差不齊,采用非參數(shù)秩和檢驗進行分析,3組間血清IL-17水平的表達量有顯著差異(P<0.01,秩和檢驗)。血清IL-17水平:RA活動組顯著高于非活動組(P<0.01)及正常對照組(P<0.01);RA非活動組也顯著高于正常對照組(P<0.01)。
結(jié)論:
1、采用半定量RT-PCR方法檢測IL-17mRNA表達水平,可見RA患者組顯著升高,
6、與臨床評分一致,說明IL-17可能在RA的發(fā)病機制方面產(chǎn)生作用;
2、RA患者的IL-17mRNA表達水平與ESR、CRP呈正相關,血清IL-17水平與RF-IgA、RF-IgM水平呈正相關,提示IL-17可能通過誘導炎癥因子表達,吸引炎性細胞在患處浸潤而參與激發(fā)RA的炎癥反應,IL-17水平可作為反映RA病情活動的一項新指標,并成為RA新的治療靶點;
3、RT-PCR結(jié)果與ELISA結(jié)果不一致,一方面可能由
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