1、背景：
　　胃癌是常見的惡性腫瘤之一，在惡性腫瘤的致死因素中排名第二。目前臨床上以TNM分期和病理組織學(xué)類型（惡性程度或分化程度）來評價胃癌患者的預(yù)后，并已經(jīng)成為判斷惡性腫瘤預(yù)后的金標(biāo)準(zhǔn)。但是TNM分期與腫瘤進(jìn)展時間密切相關(guān)，盡管腫瘤的病理學(xué)類型可以反應(yīng)腫瘤的惡性程度，臨床上仍缺乏腫瘤進(jìn)展水平的免疫學(xué)指標(biāo)，且尚無有效的分子生物學(xué)指標(biāo)準(zhǔn)確的預(yù)測胃癌患者預(yù)后。近年來有很多文獻(xiàn)研究報道，微小RNA（microRNAs，miRNAs）可以

2、促進(jìn)腫瘤的形成，并通過miRNAs表達(dá)譜發(fā)現(xiàn)正常胃粘膜組織中miRNA-195（miR-195）呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)。但是，目前對于miR-195在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的具體作用仍不明確，miR-195是否可以作為胃癌患者的預(yù)后判斷指標(biāo)值得我們進(jìn)一步研究。
　　此外，研究表明惡性腫瘤微環(huán)境中免疫性細(xì)胞如T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等分布和表達(dá)水平，可作為腫瘤患者的預(yù)后評估指標(biāo)。因此，了解惡性腫瘤微環(huán)境中的免疫性T淋巴細(xì)胞的表達(dá)水平，對惡性腫瘤患者預(yù)

3、后判斷及指導(dǎo)化療及免疫治療都具有十分重要的意義。
　　本研究旨在明確 miR-195和腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（ tumor infiltrating lymphocytes，TILs）在胃癌組織中的表達(dá)與預(yù)后的相關(guān)性，探討二者作為評價胃癌預(yù)后生物標(biāo)志物的可能性，并結(jié)合患者臨床資料與外周血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cells，CTCs）的敏感率，探討胃癌組織中miR-195水平及TILs表達(dá)與病理特征及臨床分期及

4、預(yù)后的相關(guān)性，并評價其預(yù)測價值。
　　目的：
　　分析miR-195與腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+、CD8+在胃癌中的表達(dá)變化及臨床意義。
　　方法：
　?。?）采用實時熒光定量PCR（ Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction，qRT-PCR）方法分別檢測miR-195在胃癌及其癌旁正常組織中的表達(dá)量，并分析其與臨床病理特征關(guān)系；（2）采用免疫組化法

5、分別檢測胃癌及其癌旁正常組織中、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)與陰性淋巴結(jié)中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞，并分析其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系；（3）采用免疫熒光原位雜交（immune fluorescence in situ-hybridization，imFISH）檢測47例胃癌患者術(shù)前外周血CTCs。
　　結(jié)果：
　?。?）相對于癌旁正常組織，癌組織中miR-195表達(dá)下調(diào)（P<0.05）；miR-195的表達(dá)與腫瘤惡性程度密切相關(guān)，惡性

6、程度越高，miR-195的表達(dá)水平越低（P<0.05）；miR-195的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組織中的m iR-195表達(dá)明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織，且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越多，miR-195表達(dá)越低（P<0.05）。miR-195的表達(dá)與胃癌患者性別、年齡、T分期及M分期無關(guān)（P>0.05）。（2）受試者工作特征曲線（receiver operator characteri-stic curve， ROC曲線）分析顯示對

7、于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的胃癌患者，最佳臨界值是0.584，mi R-195的敏感性是70.21％，特異性是19.61%，曲線下面積（Area Under Curve， AUC）為（0.772±0.096），95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）為0.584~0.959。（3）Kaplan-Meier生存曲線分析顯示miR-195低及高表達(dá)組3年中位無復(fù)發(fā)生存期（Relapse Free Survival，RFS）分別為

8、21.1月（95%CI：19.0~23.2）和23.8月（95%CI：16.7~31.0），二者間差異無顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（4）胃癌組織中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞明顯高于癌旁正常組織，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；陽性淋巴結(jié)中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞明顯低于陰性淋巴結(jié)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；腫瘤惡性程度越高及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越多，胃癌組織中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞計數(shù)

9、越多，陽性淋巴結(jié)中CD3+T淋巴細(xì)胞越多，陽性淋巴結(jié)中CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞計數(shù)越少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。（5）CTCs陽性為16例（34.04%），N0期1例，N1期1例，N2期9例，N3期5例。
　　結(jié)論：
　?。?）胃癌組織中miR-195的表達(dá)量可能與惡性程度呈負(fù)相關(guān)。（2）胃癌組織中miR-195的表達(dá)量可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。（3）胃癌組織中腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+、CD8+表達(dá)