1、目的：腸易激綜合征(irritable bowel syndrome，IBS)是臨床上最常見的功能性腸病(functional bowel disorders，F(xiàn)BDs)，其病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚。臨床主要表現(xiàn)為腹痛或腹部不適及大便習(xí)慣、性狀的改變。5-羥色胺是腸管動(dòng)力的一種重要神經(jīng)遞質(zhì)，在腸蠕動(dòng)、分泌及腦-腸軸的感覺信號傳遞中發(fā)揮關(guān)鍵作用。5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(SERT)是一種對5-HT有高度親和力的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，可以將效應(yīng)部位的5

2、-HT迅速再攝取，并對其滅活。本課題旨在研究SERT基因多態(tài)性對SERT表達(dá)、下游基因轉(zhuǎn)錄的影響并探討與臨床IBS癥候群和精神心理癥狀的關(guān)系。 方法：依據(jù)羅馬Ⅲ診斷標(biāo)準(zhǔn)選取C-IBS患者95例、D-IBS患者116例、A-IBS患者43例，并取健康對照120例，本課題由以下四個(gè)部分構(gòu)成： 第一部分：從全血中提取DNA，應(yīng)用PCR進(jìn)行SERT基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性(5-HTTLPR)的擴(kuò)增，瓊脂糖電泳分析5-HTTLPR多態(tài)性，并分析5-

3、HTTLPR多態(tài)性與IBS的關(guān)系。 第二部分：從全血中提取DNA，應(yīng)用PCR擴(kuò)增包含5-HTTLPR多態(tài)性等位基因的啟動(dòng)子區(qū)，應(yīng)用熒光素酶報(bào)告基因檢測系統(tǒng)研究該啟動(dòng)子對下游基因轉(zhuǎn)錄水平的影響和調(diào)控。 第三部分：從結(jié)腸粘膜組織中提取SERT蛋白，通過Western blot檢測SERT蛋白的表達(dá)量，并與5-HTTLPR多態(tài)性聯(lián)合分析，研究分析不同5-HTTLPR多態(tài)性基因型與結(jié)腸粘膜SERT蛋白表達(dá)量的關(guān)系。 第四部分：應(yīng)用精神心理

4、癥狀自評量表(SCL-90)及癥狀積分對所有研究對象進(jìn)行研究，并與SERT基因多態(tài)性、SERT表達(dá)、啟動(dòng)子功能做相關(guān)性分析。 結(jié)果：SERT基因5-HTTLPR多態(tài)性可以通過影響其下游SERT蛋白的表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致IBS患者軀體及精神癥狀的出現(xiàn)。 第一部分：觀察到兩種5-HTTLPR等位基因，L型及S型，并組成了3種基因型。5-HTTLPR基因型在IBS和對照組之間分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=1.092，P=0.579>0.05)；C-I

5、BS組L/L頻率及L等位基因頻率顯著高于對照組(x2=9.385，P=0.002<0.01；x2=5.537，P=0.019<0.05)。IBS各亞型之間分布有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=19.035，P=0.001<0.01)；將D-IBS、A-IBS組合并，C-IBS組L/L頻率顯著高于D-IBS、A-IBS組(x2=15.111，P<0.01)；將C-IBS、A-IBS組合并，D-IBS組S/S頻率顯著高于C-IBS、A-IBS組(x2=1

6、0.843，P=0.001<0.01)。 第二部分：L型等位基因的基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄活力比S型等位基因要高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 第三部分：L/L型較L/S型和S/S型具有較高的蛋白表達(dá)效率(P<0.01)，而L/S型與S/S型的蛋白表達(dá)效率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　第四部分：IBS組與對照組蛋白表達(dá)量無差異(P>0.05)；但不同IBS亞型SERT蛋白的表達(dá)量差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中C-IBS蛋白表達(dá)量

7、高于A-IBS、D-IBS和對照組(P<0.05)，A-IBS蛋白表達(dá)量與D-IBS蛋白表達(dá)量無差異性(P>0.05)。 SERT蛋白表達(dá)量與軀體化癥狀(P<0.01，r=-0.67)、抑郁因子(P<0.01，r=-0.81)、焦慮因子(P<0.01，r=-0.72)和敵對因子(P<0.01，r=-0.66)呈負(fù)相關(guān)；與人際關(guān)系敏感、強(qiáng)迫癥狀、恐怖、偏執(zhí)和精神病因子均不存在相關(guān)性(P>0.05)。 結(jié)論：SERT基因5-HTTLPR

8、多態(tài)性可通過影響下游SERT蛋白的表達(dá)效率而出現(xiàn)不同的IBS亞型及相應(yīng)征候群，并對其精神心理因素產(chǎn)生影響。具有L/L基因型的人群易患C-IBS，而具有S/S基因型的人群更易患D-IBS；L型等位基因的基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄活力比S型等位基因要高；L/L型較L/S型和S/S型具有較高的蛋白表達(dá)效率；結(jié)腸黏膜SERT蛋白的含量可影響IBS患者的部分精神癥狀，SERT蛋白含量越少患者越容易出現(xiàn)軀體化、焦慮、抑郁和敵對的情緒表現(xiàn)。研究表明SERT在IBS的發(fā)