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![手術(shù)減壓對(duì)大鼠脊髓撞擊并壓迫模型的神經(jīng)細(xì)胞自噬與凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/3c64aaa4-797d-4649-b526-2612f0a08b87/3c64aaa4-797d-4649-b526-2612f0a08b871.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察手術(shù)減壓對(duì)大鼠脊髓撞擊并壓迫模型的脊髓組織細(xì)胞自噬與凋亡的影響,探討手術(shù)減壓促進(jìn)脊髓功能恢復(fù)的機(jī)制。
方法:
清潔級(jí)Sprague-Dawley大鼠72只,體重250~300g,按隨機(jī)數(shù)字表法分為持續(xù)壓迫組(n=24)、手術(shù)減壓組(n=24)、假手術(shù)組(n=24)。采用Allen’s法+自制壓迫件置入椎管造成脊髓急性損傷合并椎管內(nèi)占位,各組分別在造模后8h、24h、3d、7d取材。采用BBB評(píng)分
2、法評(píng)估大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能變化,RTFQ-PCR檢測(cè)樣本Beclin-1mRNA和Bcl-2mRNA表達(dá),免疫熒光法檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3的表達(dá),活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定半胱氨酰天冬氨酸特異性蛋白酶-3(Caspase-3)的活性。
結(jié)果:
1、BBB評(píng)分:持續(xù)壓迫組和手術(shù)減壓組SD大鼠脊髓損傷后3d始見下肢活動(dòng),兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;造模后7d手術(shù)減壓組大鼠BBB評(píng)分高于持續(xù)壓迫組(P<0.05);假手術(shù)組大鼠BBB評(píng)分在術(shù)
3、后8h、24h、3d、7d相互間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2、熒光定量PCR結(jié)果
2.1在各個(gè)時(shí)間點(diǎn),持續(xù)壓迫組和手術(shù)減壓組大鼠脊髓組織Beclin-1mRNA表達(dá)水平均較假手術(shù)組升高(P<0.05),持續(xù)壓迫組高于手術(shù)減壓組(P<0.05)。
2.2損傷后24h、3d、7d,手術(shù)減壓組大鼠脊髓組織Bcl-2mRNA表達(dá)水平高于持續(xù)壓迫組(P<0.05)。
3、免疫熒光染色:熒光顯微鏡下觀察到LC3在持
4、續(xù)壓迫組和手術(shù)減壓組神經(jīng)細(xì)胞中均有較高表達(dá)。在各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn),手術(shù)減壓組LC3陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)低于持續(xù)壓迫組(P<0.05)。
4、Caspase-3活性檢測(cè)結(jié)果:手術(shù)減壓組Casepase-3活性在損傷后8h、24h、3d、7d較持續(xù)壓迫組均降低(P<0.05)。
結(jié)論:
1、脊髓損傷后,自噬在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)升高,手術(shù)減壓可以使脊髓損傷后細(xì)胞自噬的表達(dá)下降。
2、脊髓損傷后,凋亡在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)增
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