1、目的：觀察大鼠脊髓神經(jīng)元細胞缺氧復(fù)氧損傷中鈣敏感受體的表達變化及其和細胞凋亡的相關(guān)性。
　　方法：利用原代培養(yǎng)的新生SD大鼠脊髓神經(jīng)元建立缺氧-復(fù)氧損傷（A/R）模型，隨機分成4組：正常對照組、缺氧-復(fù)氧組（A/R）、激活組（A/R+GdCl3）、抑制組（A/R+NPS2390）。應(yīng)用Hoechest33258染色觀察各組脊髓神經(jīng)元凋亡。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)分析鈣敏感受體及鈣蛋白酶蛋白在脊髓神經(jīng)元的表達定位。運用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)檢測鈣敏

2、感受體、鈣蛋白酶、Bax蛋白在不同處理組中的表達變化。
　　結(jié)果：1.鈣敏感受體和鈣蛋白酶分布于脊髓神經(jīng)元細胞的胞膜、胞漿和突起。2.缺氧-復(fù)氧組較對照組相比， CaSR、鈣蛋白酶、Bax蛋白表達升高，同時細胞凋亡增加。3.較缺氧-復(fù)氧組相比，激活組進一步升高了CaSR、鈣蛋白酶、Bax蛋白的表達；而抑制組上述作用相反。
　　結(jié)論：1.大鼠脊髓神經(jīng)元中存在鈣敏感受體和鈣蛋白酶的表達，且都分布于脊髓神經(jīng)元細胞的胞膜、胞漿和突起

3、部。2.缺氧-復(fù)氧可激活CaSR，并且增加脊髓神經(jīng)元的凋亡。應(yīng)用激動劑GdCl3可以加重原本存在的缺氧復(fù)氧損傷，增加凋亡；抑制劑NPS2390作用相反。說明CaSR參與了缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)的脊髓神經(jīng)元凋亡的過程。3.CaSR的激動或者抑制，都伴隨著鈣蛋白酶表達的升高或降低，說明在缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)的脊髓神經(jīng)元凋亡的過程中，CaSR與鈣蛋白酶存在正相關(guān)性。4.應(yīng)用抑制劑NPS2390可以明顯抑制細胞凋亡，減少細胞缺氧-復(fù)氧損傷。因此，特異性的Ca