1、目的：瓜蔞通脈丸（由瓜蔞、黨參、丹參、延胡索、三七、赤芍、白芍組成）是在多年臨床觀察篩選效方的基礎(chǔ)上，由湯劑改變?yōu)橥鑴┒?，具有理氣化痰，活血化瘀通絡(luò)之功，臨床觀察已證實(shí)對(duì)心血管疾病有較好的療效。為了進(jìn)一步探討其作用機(jī)制，參考相關(guān)文獻(xiàn)采用連續(xù)皮下注射異丙腎上腺素的方法復(fù)制大鼠急性心肌缺血損傷模型，并給予藥物干預(yù)，觀察其對(duì)心肌缺血大鼠心電圖ST 段變化、心肌酶、硫化氫以及血清和心肌組織一氧化氮、一氧化氮合酶、超氧化物歧化酶、丙二醛含量的影

2、響，探討瓜蔞通脈丸對(duì)大鼠缺血心肌損傷的保護(hù)作用機(jī)制，為進(jìn)一步臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：選用SD大鼠50只（體重180～210g，雌雄不拘），大鼠自由飲水進(jìn)食，飼養(yǎng)于18℃～22℃明暗各12小時(shí)的清潔級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)5天后，隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組（簡稱正常組）；模型對(duì)照組（簡稱模型組）；瓜蔞通脈丸低劑量組（簡稱低劑量組）；瓜蔞通脈丸高劑量組（簡稱高劑量組）；美托洛爾組（簡稱對(duì)照組）；每組各10只。除正常組外，各組每天

3、均皮下注射ISO 5mg/kg，連續(xù)10d，復(fù)制大鼠冠心病心肌缺血模型。正常組皮下注射等量的生理鹽水。大鼠造模的同時(shí)，瓜蔞通脈丸高、低劑量組分別給予4、2g/（kg·d）瓜蔞通脈丸灌胃，對(duì)照組按0.1g/（kg·d）的標(biāo)準(zhǔn)灌胃，正常組和模型組等灌服等容積的生理鹽水，1次/日。于末次注射ISO后，大鼠稱重，禁食不禁水12h，水合氯醛3mL/kg 腹腔注射麻醉，仰臥位固定，四肢皮下插入針狀電極，連接BL-420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，記錄標(biāo)準(zhǔn)

4、Ⅱ?qū)?lián)心電圖ST 段的變化。然后在麻醉狀態(tài)下頸動(dòng)脈采血，將血樣低溫離心，分離血清或血漿，檢測NO、NOS、SOD、MDA、H2S 含量的變化。取血后迅速開胸剖取心臟，在心尖部取適量的心肌組織，將心肌組織在預(yù)冷的生理鹽水中漂洗2次，除去血液，濾紙拭干，用分析天平稱重，以生理鹽水制成10％勻漿，檢測NO、NOS、SOD、MDA 含量的變化。硝酸鹽還原酶法測定NO 含量，吸光度法測定NOS 活性；MDA、SOD的含量檢測嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)

5、行。血漿中H2S的檢測采用敏感硫電極法。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：1瓜蔞通脈丸對(duì)ISO 所致大鼠心肌缺血心電圖ST 段的影響模型組大鼠心電圖ST 段的變化（0.94±0.33）明顯高于正常組（0.13±0.09）（P＜0.01)，顯示心肌缺血造模成功。經(jīng)藥物干預(yù)后高劑量組和對(duì)照組大鼠心電圖ST 段的變化值（0.37±0.21、0.51±0.25）均明顯低于模型組（P＜0.01)。高劑量組和對(duì)照組之間比較無顯著

6、性差異(P＞0.05)。2 瓜蔞通脈丸對(duì)血清心肌酶的影響模型組血清LDH、CK 含量（749.3±168.23、3218.5±674.2）較正常組（334.5±148.5、1557.3±539.5）明顯升高(P＜0.01)，表明心肌缺血造模成功；經(jīng)藥物干預(yù)后，各用藥組LDH、CK 含量較模型組均明顯降低(P＜0.05 或P＜0.01)；瓜蔞通脈丸高劑量組（1751.6±562.7）在降低血清CK 含量方面優(yōu)于低劑量組（2 397.8±1

7、001.4）和對(duì)照組（2381.8±489.8）(P＜0.05)；各用藥組在降低血清LDH 含量方面的比較無顯著性差異(P＞0.05)。3 瓜蔞通脈丸對(duì)血清及心肌組織NO 含量影響與正常組（40.7±4.8、11.34±2.48）相比， 模型組血清和組織中NO（28.7±3.8、6.34±1.24）的含量顯著降低（P＜0.01）。經(jīng)藥物干預(yù)后，各用藥組大鼠的血清及組織中NO 含量顯著升高（P＜0.05 或P＜0.01）。其中，瓜蔞通脈丸

8、高（41.7±5.1、11.17±2.41）、低（40.8±3.6、10.78±2.36）劑量組在血清及組織中升高NO 含量方面優(yōu)于對(duì)照組（36.2±4.1、8.57±1.83） (P＜0.05 或P＜0.01)，而高、低劑量組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05)。4 瓜蔞通脈丸對(duì)血清及心肌組織NOS 活性的影響模型組與正常組比較，模型組血清和組織中NOS（12.72±3.06、0.68±0.19）活性顯著降低（P＜0.01）。經(jīng)藥物干

9、預(yù)后，各用藥組血清及組織中NOS 活性均能顯著升高(P＜0.05 或P＜0.01)。但各用藥組相比較，無顯著性差異(P＞0.05)。5 瓜蔞通脈丸對(duì)血清及心肌組織MDA、SOD的影響模型組血清及組織中（4.39±1.25、3.91±0.66）MDA 含量較正常組（2.66±1.06、1.93±0.37）明顯升高(P＜0.01)，而模型組血清及組織中（74.70±15.70、52.58±9.24）SOD較正常組（130.60±26.57、

10、76.85±6.36）明顯降低(P＜0.01)；經(jīng)藥物干預(yù)后，各用藥組均能降低血清及組織中MDA 含量和升高SOD的活性(P＜0.05 或P＜0.01)；瓜蔞通脈丸高（120.73±26.43、73.89±7.55）、低劑量組（118.45±26.52、70.09±8.26）在升高血清及組織SOD 活性方面優(yōu)于對(duì)照組（95.78±18.74、62.35±8.86）(P＜0.05 或P＜0.01)；而各用藥組在降低MDA 含量方面比較無顯

11、著性差異(P＞0.05)。6 瓜蔞通脈丸對(duì)血漿H2S濃度的影響各組大鼠血漿中H2S濃度存在顯著差異，模型組（16.20±2.86）較正常組（24.69±4.05）相比，H2S濃度明顯降低（P＜0.01）。給予藥物干預(yù)后，瓜蔞通脈丸高（20.45±2.99）、低劑量組（23.81±3.88）及對(duì)照組（19.08±2.49）H2S濃度顯著升高(P＜0.05 或P＜0.01)。瓜蔞通脈丸低劑量組在升高血漿H2S 方面優(yōu)于高劑量組及對(duì)照組(P＜

12、0.05 或P＜0.01)。而高劑量組與對(duì)照組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05)。結(jié)論：1.瓜蔞通脈丸能明顯改善急性心肌缺血大鼠心電圖ST 段的變化，降低心肌酶LDH、CK的活性。說明瓜蔞通脈丸可能通過改善心肌的血氧供應(yīng)，減輕心肌缺血損傷程度和范圍，保護(hù)和穩(wěn)定心肌細(xì)胞，從而達(dá)到治療心肌缺血的作用。2.瓜蔞通脈丸能提高心肌缺血大鼠血清及心肌組織中NO、NOS的含量，促進(jìn)內(nèi)源性NO生成和釋放，擴(kuò)張血管、保護(hù)血管內(nèi)皮功能，從而發(fā)揮抗心肌缺血