1、第一部分
　　 目的：觀察高、低強度跑臺運動對大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)的不同影響。
　　 方法： 18只雄性Wistar成年大鼠隨機分為：安靜組（n=6），低強度運動組（n=6）和高強度運動組（n=6）。兩組運動組大鼠進行不同強度的跑臺運動，安靜組籠中飼養(yǎng)，作為對照。6周后，取血清標本ELISA法測定血清基質(zhì)金屬蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3，MMP-3）；取雙側(cè)股骨遠端標本，分別采用蕃紅-O

2、染色對膝關(guān)節(jié)軟骨行Mankin’s評分及半定量分析軟骨基質(zhì)糖氨多糖（glycosaminoglycans，GAG）含量；免疫組化檢測軟骨MMP-3活性和Ⅱ型膠原表達；以及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測軟骨MMP-3 mRNA表達。
　　 結(jié)果：
　　 1、與安靜組相比，低強度運動組Mankin’s評分（0.500±1.000vs0.250±0.500）及軟骨基質(zhì)中GAG含量（0.028±0.012vs0.060±0.037）均無

3、顯著變化；而高強度運動組Mankin’s評分顯著增加（3.500±1.049，P=0.009），基質(zhì)中GAG含量明顯減少（0.010±0.011，P=0.0016）。
　　 2、安靜組軟骨基質(zhì)Ⅱ型膠原纖維染色呈陽性（平均光密度值0.578±0.123），低強度運動組Ⅱ型膠原含量（0.559±0.152）與安靜組無明顯變化，高強度運動組Ⅱ型膠原含量（0.142±0.093）較安靜組明顯減少（P=0.0001）。
　　 3、

4、安靜組可見少數(shù)軟骨細胞MMP-3表達，胞漿內(nèi)可見棕色顆粒，但著色淺，陽性細胞率（8.350±4.063）％。低強度運動組軟骨中未見明顯陽性細胞分布(4.960±2.850)％。高強度運動組陽性細胞率（82.530±11.505）％明顯多于安靜對照組和低強度運動組（P=0.0001），胞漿內(nèi)可見棕褐色顆粒。
　　 4、高強度運動組血清MMP-3濃度為86.850±33.158 ng/ml，明顯高于安靜組11.437±0.920ng

5、/ml（P=0.001），而低強度運動組血清MMP-3濃度 (11.955±0.422 ng/ml)與安靜組相比無顯著差異。
　　 5、高強度運動組軟骨細胞MMP-3 mRNA表達高于安靜組（0.697±0.567vs0.030±0.026，P=0.042），低強度運動組MMP-3 mRNA表達（0.018±0.028）與安靜組對比，無明顯差異。
　　 結(jié)論：高強度運動可造成大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨退行性病變，低強度運動對關(guān)節(jié)軟骨

6、無明顯影響。軟骨運動性損傷可能與軟骨基質(zhì)MMP-3表達增強有關(guān)。
　　 第二部分目的第一部分研究結(jié)果表明：高強度運動導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨退行性改變，并伴有MMP-3含量升高。為進一步明確MMP-3在高強度運動所致軟骨退變中的作用，本部分研究擬采用關(guān)節(jié)內(nèi)注射MMP-3抑制劑，觀察其對高強度運動所致軟骨變化的影響。
　　 方法： 18只雄性成年Wistar大鼠隨機均分為三組：高強度運動組（H-EX， n=6）、高濃度組（high d

7、ose inhibitor+high intensity exercise，h-HEX，n=6）和低濃度組（low dose inhibitor+high intensity exercise，l-HEX，n=6）。所有動物采用高強度跑臺訓(xùn)練6周（方案同第一部分），兩組給藥組動物在運動3周后，分別在雙側(cè)膝關(guān)節(jié)腔注射高濃度（2 mM）和低濃度（0.2 mM）基質(zhì)金屬蛋白酶-3抑制劑Ⅰ（matrix metalloproteinase-3

8、inhibitor Ⅰ，MMP-3 inhibitor Ⅰ），每周1次，共注射3周。蕃紅-O染色對膝關(guān)節(jié)軟骨進行Mankin’s評分及半定量分析軟骨基質(zhì)糖氨多糖（glycosaminoglycans，GAG）含量；ELISA法測定血清基質(zhì)金屬蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3，MMP-3）；免疫組化檢測軟骨MMP-3和Ⅱ型膠原表達；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測軟骨MMP-3 mRNA表達。
　　 結(jié)果

9、r>　　 1、與HEX組相比，h-HEX組Mankin’s評分顯著降低（1.167±0.753vs3.500±1.049，P=0.006），基質(zhì)中GAG含量明顯增加（0.040±0.012vs0.010±0.011，P=0.006）；而l-HEX組軟骨Mankin’s評分（2.667±1.033）及基質(zhì)GAG的含量（0.008±0.004）無明顯變化。
　　 2、h-HEX組Ⅱ型膠原纖維含量（平均光密度值0.391±0.096

10、）較l-HEX組（0.186±0.100，P=0.002）和HEX組（0.142±0.093，P=0.0001）均有顯著增加，而H-EX組和l-HEX組之間并無顯著差異。
　　 3、免疫組化染色顯示l-HEX組（17.680±13.789）％及h-HEX組（5.590±2.977）％關(guān)節(jié)軟骨內(nèi)MMP-3陽性細胞率，均明顯低于H-EX組（82.530±11.505）％（P分別為0.001和0.002）。
　　 4、與H-E

11、X組相比，l-HEX組（62.810±35.485 ng/ml）及h-HEX組血清中的MMP-3濃度有不同程度下降，并且高濃度給藥后血清MMP-3濃度明顯低于H-EX組（30.749±40.416 ng/mlvs86.850±33.158 ng/ml，P=0.026）。
　　 5、RT-PCR半定量顯示h-HEX組軟骨中MMP-3 mRNA表達低于H-EX組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（平均灰度比0.121±0.056vs0.697±0.