兩株無患子內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物及其抗菌活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、微生物是巨大的天然活性產(chǎn)物資源庫,尤其是植物內(nèi)生菌,作為一種新的微生物資源也受到人們越來越多的重視,也有越來越多的活性物質(zhì)從植物內(nèi)生菌的代謝產(chǎn)物中分離得到。本論文研究了來源于藥用植物無患子的兩株內(nèi)生真菌的次生代謝產(chǎn)物及其抗菌活性,主要內(nèi)容包括藥用植物無患子(Sapindus mukorossi Gaertn.)內(nèi)生真菌的篩選,兩株活性菌株的鑒定及擴大培養(yǎng),菌株代謝產(chǎn)物的成分分離,單體化合物結(jié)構(gòu)鑒定及其生物活性評價。
  本論文采用

2、抗菌活性篩選為主、代謝產(chǎn)物化學成分預測為輔的二級篩選組合模型,通過活性初篩、成分復篩,從無患子來源的六株無患子內(nèi)生真菌(HY11-1、HY11-2、ye5、ye4、P11、O)中篩選出兩株抗菌活性較強的內(nèi)生真菌HY11-1和ye5作為研究對象。結(jié)合目的菌株的形態(tài)學觀察和18S rDNA序列分析,菌HY11-1系統(tǒng)發(fā)育樹顯示該菌株與鏈格孢(No.HM165489.1)聚在一支,且平板生長狀態(tài)及顯微鏡觀察結(jié)果與鏈格孢相符,因此將菌HY11-

3、1鑒定為鏈格孢(Alternaria alternate);菌ye5系統(tǒng)發(fā)育樹顯示該菌株與赭曲霉(No.AF548065.1)聚在一支,且平板生長狀態(tài)及顯微鏡觀察結(jié)果與之相符,因此將菌ye5鑒定為赭曲霉(Aspergillus ochraceus)。采用察氏培養(yǎng)基對菌株HY11-1和ye5進行擴大發(fā)酵并對發(fā)酵液進行萃取,合并有機相旋蒸獲得粗提物。
  利用現(xiàn)代色譜技術(shù)(UV-HPLC等)分離得到10個單體化合物,其中菌HY11-1

4、來源有6個(1-6),菌ye5有4個(7-10)。采用波譜技術(shù)(NMR、MS等)鑒定了這些化合物的化學結(jié)構(gòu),分別為tricycloalternarenes3a(1)、di-isobutyl phthalate(2)、tricyclo-alternarenes3b(3)、ACTG toxins F(4)、tricyclo-alternarenes2b(5)、tricycloalternarenes14b(6),circumdatin C(

5、7),circumdatin G(8),10-hydroxyl-3,4-dihydro-3-methyl-1H-1,4-benzodiazepine-2,5-dione(9),環(huán)二肽化合物cyclo-try-pro(10)。其中,化合物6為新化合物。
  本論文采用梯度稀釋法對化合物1-10進行體外抗菌研究,結(jié)果表明,化合物1-10的體外抑菌能力整體較弱,其中對于白色念珠菌,化合物4對其抑制作用最強(MIC值為15.63μM),化

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