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文檔簡介
1、阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii)是一種條件病原菌,嬰幼兒或免疫功能不全的病人容易感染,引起嚴重的腦膜炎或腸炎。該菌在許多不同類型的食品以及奶制品加工設(shè)備中都有發(fā)現(xiàn),特別是嬰幼兒配方奶粉,它是主要污染來源,常與感染該菌引發(fā)的疾病爆發(fā)相關(guān)。在如此環(huán)境下生存并繁殖的原因可能是由于阪崎腸桿菌的具有粘附以及形成生物膜的能力。
群體感應(yīng)是依賴于細胞密度的細胞間交流過程。它包括具有擴散性的信號分子,其通過激活目標基
2、因來控制密度依賴行為,如生物膜形成、群集運動、色素合成、胞外多糖合成以及抗生素的產(chǎn)生過程等。
當(dāng)前用抗生素來治療細菌性疾病的方法受到耐藥性細菌傳播的嚴重威脅,耐藥性細菌可導(dǎo)致持續(xù)性感染,且常涉及到高抗性生物膜的形成,生物膜的形成與群體感應(yīng)機制的表達密切相關(guān),但是它們在阪崎腸桿菌的的作用模式并不清晰。
本文旨在研究阪崎腸桿菌信號分子的產(chǎn)生以及?;呓z氨酸內(nèi)酯降解與生物膜形成的關(guān)系。本研究還報道了阿魏植物精油的抗群體感應(yīng)
3、活性,它可以干擾細菌的交流系統(tǒng)。但它對阪崎腸桿菌的抑制活性還需要進一步研究確認。本文研究結(jié)果如下:
1.A. tumefaciens NTL4(pZLR4), C. violaceum CVO26作為生物檢測的報告菌來檢測?;呓z氨酸內(nèi)酯。實驗方法包括瓊脂試驗(平行畫線法,瓊脂擴散法)、TLC-生物傳感器分析、β-半乳糖苷酶活性試驗。這些方法結(jié)合生物傳感器,試驗靈敏、簡單且合理。
2.阪崎腸桿菌 ATCC51329所
4、產(chǎn)生的?;呓z氨酸內(nèi)酯通過 TLC-生物傳感器試驗分析,檢測出了兩種結(jié)構(gòu)的信號分子:(S)-N-3-oxo-hexanoyl-HSL和(S)-N-3-oxo-octanoyl-HSL。
3.采用 HPLC-MS法對阪崎腸桿菌 ATCC51329產(chǎn)生的分子進一步鑒定,結(jié)果表明,這株菌產(chǎn)生5種可鑒定的分子: C12-HSL, C14-HSL,3-oxo-C4-HSL3-OH-C8-HSL, UHQ。
4.阪崎腸桿菌產(chǎn)生的
5、acyl-HSLs被A. tumefaciens NT1(pZRL4)(pME6863)所消耗,說明acyl-HSLs被A. tumefaciens NT1(pZRL4)(pME6863)中的水解酶所降解。這一過程同時也降低阪崎腸桿菌生物膜的形成。這些實驗結(jié)果說明了生物膜的形成與acyl-HSLs信號分子的濃度關(guān)系密切。
5.采用肉湯微量稀釋法對阿魏精油的抗菌活性進行了研究,同時使用紫色桿菌作為細菌模型對阿魏精油的群體抑制劑活
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