1、近年來，特異性DNA序列的檢測在環(huán)境保護、食品安全和質量監(jiān)測、分子診斷等方面具有潛在的應用價值，已成為一個重要的研究領域。隨著現(xiàn)代轉基因生物技術的不斷發(fā)展，隨之而來的不確定性和不成熟性使得轉基因食品安全問題越發(fā)引起公眾的重視，轉基因食品特定的堿基序列的檢測也越來越重要。在不同的DNA檢測方法中，電化學方法引起了相當?shù)年P注，由于其簡單、快速、低成本的優(yōu)點，已成為醫(yī)學、生物學、食品科學等領域的新型課題。
　　本文分別以5'-TCA T

2、CA TCA GTC TGA TAA CGT A-3'和花椰菜花葉病毒35S(CaMV35S)啟動子區(qū)的5'-GGC TCC TAC AAA TGC CAT CAT T-3'序列為檢測對象，利用復合碳納米材料如硫堇-氧化還原石墨烯(Thi-rGO)和血紅素-還原氧化石墨烯(hemin-rGO)以及金納米顆粒(AuNPs)等納米材料修飾玻碳電極(GCE)，構建了操作方便、靈敏度高、低檢測限的新型電化學DNA生物傳感器。
　　本文研究

3、內容主要包含以下兩部分:
　　1.免標記的DNA/Thi-rGO電化學傳感器
　　該部分研究是在GCE上設計了一個轉導界面，構建了免標記DNA生物傳感器。界面由捕獲DNA序列(CP)，AuNPs和Thi-rGO組成。由于Thi在Thi-rGO納米復合材料中具有優(yōu)異的電化學活性，因此硫堇的氧化還原反應可直接誘導信號轉導。然而，氧化還原反應將受到隨后固定在GCE表面上的生物分子的阻礙。因此，通過檢測CP和tDNA雜交前后Thi的

4、伏安響應電流，可以實現(xiàn)靶序列(tDNA)的測定。在最佳條件下，峰電流隨著tDNA濃度的對數(shù)在1.0×10-17～1.0×10-12M范圍內線性下降，檢出限為4.28×10-19M(S/N=3)。DNA生物傳感器顯示出可接受的選擇性，穩(wěn)定性和可重復性的優(yōu)點。提出的DNA生物傳感器應用于實際生物樣品中的tDNA檢測，回收率高于95.61％。
　　2.基于hemin-rGO和Thi修飾AuNPs雙重放大的三明治DNA傳感器CaMV35S

5、序列的檢測
　　該部分研究以轉基因花椰菜花葉病毒35S啟動子開發(fā)了一種電化學DNA生物傳感器，可用于檢測目的DNA片段。首先，根據(jù)以前的方法制備了hemin-rGO，然后修飾在GCE上，AuNPs電沉積在hemin-rOO表面上以固定捕獲DNA。在此平臺的基礎上，設計了三明治型的電化學DNA生物傳感器。當目標DNA存在時，用5'-SH標記的第三條輔助DNA與目標DNA雜交，然后通過Au-S的共價結合吸剛AuNPs。之后，將電極浸泡