茭白黑粉菌原生質(zhì)體制備及核型初步分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、茭白(Zizania latifolia Turcz.)為禾本科菰屬(Zizania Linnaeus)多年生水生宿根草本植物,其膨大肉質(zhì)莖是茭白生長期間受茭白黑粉菌(Ustilago esculenta P.Henn.)侵染后刺激而形成。明確茭白黑粉菌的分子生物學(xué)特性是了解茭白莖膨大機制的前提。
   本文探討了利用脈沖電泳技術(shù)分離茭白黑粉菌的染色體大小和數(shù)量。試驗發(fā)現(xiàn),茭白黑粉菌脈沖電泳的最佳樣品制備方法是酶解破壁法,具體為

2、:取液體培養(yǎng)36h的茭白黑粉菌孢子,用1.4 mol/l KCl(pH=5.8)配制的終濃度均為10 mg/ml的裂解酶、崩潰酶和纖維素酶的混合液[酶解液(ml)∶孢子(g)=20],在30℃,70 rpm條件下對其進行震蕩酶解4h。
   此外,本試驗通過調(diào)整脈沖電泳的參數(shù),分離出了茭白黑粉菌大小分別為1822kb、1606kb、873kb、727 kb、648kb、564 kb、533kb、464kb、438 kb和396k

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