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1、目的:本課題研究的目的是通過建立大鼠大腦中動(dòng)脈缺血后再灌注的模型,用神經(jīng)功能缺失行為學(xué)評(píng)分對(duì)模型予以評(píng)價(jià);然后通過TTC染色測(cè)定梗死范圍、大鼠腦組織的組織病理學(xué)和腦血管造影等更深層次的分析再通時(shí)間與血管損傷之間的關(guān)系,為探討血管再灌注最佳時(shí)間段提供理論依據(jù)。
方法:動(dòng)物分組:取健康成年SD大鼠50只,體重250~280g,周齡8~10周,隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組10只,實(shí)驗(yàn)組40只,按梗塞后不同取栓時(shí)間分為6小時(shí)、12小時(shí)
2、、24小時(shí)、72小時(shí)共4個(gè)亞組。實(shí)驗(yàn)組使用線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈缺血模型。各組大鼠術(shù)后進(jìn)行神經(jīng)功能缺失行為學(xué)評(píng)分,1~3分者入選實(shí)驗(yàn)。于預(yù)定時(shí)間點(diǎn)拔出大鼠線栓,進(jìn)行血管造影,然后斷頭取腦,使用HE染色光鏡觀察大鼠腦組織病理學(xué)改變、TTC染色確定腦梗塞范圍。對(duì)血管造影進(jìn)行觀察,對(duì)一、二、三、四級(jí)血管進(jìn)行計(jì)數(shù),觀察血管情況。數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS15.0軟件統(tǒng)計(jì)。
結(jié)果:大鼠大腦中動(dòng)脈缺血模型的制作成功,穩(wěn)定性高。栓塞后的大鼠均表
3、現(xiàn)出不同程度的偏癱癥狀。
大鼠腦組織TTC染色顯示,正常呈鮮紅色,梗死區(qū)呈蒼白色,隨著梗死時(shí)間的延長(zhǎng)梗死區(qū)呈逐漸擴(kuò)大趨勢(shì)。
腦組織病理學(xué)及電鏡下腦細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)顯示,24小時(shí)后梗塞中心區(qū)域出現(xiàn)大量神經(jīng)元不可逆性壞死;缺血時(shí)間延長(zhǎng),壞死程度加重,壞死范圍擴(kuò)大;缺血半暗區(qū)部分神經(jīng)元可修復(fù)性壞死,多數(shù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損。
腦血管造影觀察:正常組血管走行正常,分支清晰:缺血6小時(shí),梗塞側(cè)部分三、四級(jí)血管腦血管閉
4、塞、痙攣、缺失;缺血12小時(shí),大部分三、四級(jí)腦血管閉塞、痙攣、缺失;缺血24小時(shí),三、四級(jí)腦血管不再顯影,部分一、二級(jí)分支閉塞、痙攣、缺失;72小時(shí),腦血管造影只剩余主干,即大腦中動(dòng)脈。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示:一、二級(jí)腦血管造影計(jì)數(shù),在正常組與6小時(shí)、12小時(shí)實(shí)驗(yàn)組之間無明顯差異(P>0.05),24小時(shí)、72小時(shí)實(shí)驗(yàn)組與正常組、6小時(shí)、12小時(shí)實(shí)驗(yàn)組比較顯示血管計(jì)數(shù)明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);三、四級(jí)腦血管造影計(jì)數(shù),6小時(shí)、1
5、2小時(shí)實(shí)驗(yàn)組與正常組比較顯示血管計(jì)數(shù)明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
1.線栓法制作大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型效果良好。經(jīng)神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分、腦組織大體標(biāo)本、TTC染色、HE染色組織及電鏡下細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察等證實(shí)造模成功。
2.腦梗塞時(shí)間在24小時(shí)~72小時(shí)時(shí),腦血管損傷程度最重,梗塞中心區(qū)神經(jīng)元不可逆性壞死明顯,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),壞死程度加重;缺血半暗區(qū)部分神經(jīng)元壞死,多數(shù)呈可
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