1、目的：建立人牙周膜細胞（human periodontal ligament cells hPDLCs）體外張應力加載模型，探討弱激光照射（low level laser irradiation，LLLI)對受張應力刺激的hPDLCs成骨分化的影響，為揭示LLLI促進正畸牙移動的分子生物學機制奠定理論基礎。
　　方法：
　　1、取臨床健康青少年(12-16歲)因正畸治療需要拔除的雙尖牙根中1/3牙周膜組織，通過組織塊結合酶消

2、化法對hPDLCs進行原代分離培養(yǎng)，常規(guī)的換液、消化、傳代，細胞呈貼壁生長狀態(tài)。取第三代細胞用于細胞來源的鑒定，第四代細胞用于本實驗中。
　　2、人牙周膜細胞應力及激光加載實驗：取第四代細胞常規(guī)復蘇后，分為三組，即A組（空白組）、B組（張應力加載組）和C組（弱激光照射并張應力加載組），接種于6孔板中。A組細胞既不加力也不照射；B組細胞分別給予2h、6h、12h、24h的10％周期性張應力刺激；C組細胞先進行2s、5s激光照射，再分

3、別進行2h、6h、12h、24h的周期性張應力加載。
　　3、提取各組細胞的總RNA和總蛋白，通過實時熒光定量檢測技術（qRT-PCR）和免疫印跡（Western Blotting）檢測技術，對各組成骨分化指標ALP、Runx2、OCN進行基因及蛋白檢測。
　　4、應用SPSSl7.0醫(yī)用統(tǒng)計軟件包進行方差分析。實驗所得數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標準差(x±s）表示。應用方差分析的統(tǒng)計方法，對A組、B組、C組各指標的mRNA和蛋白表達量

4、差異進行統(tǒng)計學分析；使用LSD-t檢驗方法進行均數(shù)間的兩兩比較，以p<0.05視為有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　1、hPDLCs鑒定:鏡下觀察，細胞呈長梭形，排列成放射狀或是漩渦狀。細胞抗波形絲蛋白染色陽性，抗角蛋白染色陰性，說明所得細胞為間充質來源。
　　2、qRT-PCR檢測結果顯示:不同的加力時間段，不同的激光照射劑量條件下，ALP、Runx2、OCN的mRNA表達量A組、B組、C組任兩組間比較差異有顯著性（p

5、<0.05）。C1、C2組之間比較差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05），隨加力時間延長，激光照射時間增加，mRNA的表達增強，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。
　　3、Western Blotting檢測結果顯示:ALP、Runx2、OCN的蛋白表達量隨加力時間和激光照射時間增加而增加，各組之間差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；C1、C2組蛋白表達量比較差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。A組、B組、C組蛋白表達量結果與mRNA表達趨