水杉離體組織培養(yǎng)及其影響黃酮類(lèi)物質(zhì)合成因素的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、水杉(Metasequoia glyptostroboides Hu et)隸屬杉科(Taxodiaceae)水杉屬(Metasequoia),是世界上珍稀的孑遺植物,為我國(guó)一級(jí)保護(hù)的特有樹(shù)種,被譽(yù)為植物界的“活化石”,水杉的發(fā)現(xiàn)是20世紀(jì)植物學(xué)界最重大的發(fā)現(xiàn)之一。水杉總黃酮的藥理學(xué)研究表明其具有抗心律失常和抗心肌肥厚等作用,在針對(duì)心血管疾病開(kāi)發(fā)藥物方面具有很好的前景,水杉作為一種可再生藥用植物,受到了廣泛的重視。本研究以水杉的帶腋芽莖

2、段和莖尖為外植體,探索了外植體培養(yǎng)的最佳激素配比,系統(tǒng)地研究了外植體形成無(wú)菌苗體系的過(guò)程及影響因素,同時(shí)探究苗木生長(zhǎng)過(guò)程中影響黃酮類(lèi)物質(zhì)積累的各種因素。主要研究成果如下:
   ⑴無(wú)菌體系建立:水杉外植體隨著滅菌時(shí)間的延長(zhǎng),感染率逐漸降低,但同時(shí)其褐化率也逐漸升高。結(jié)果顯示,先用75%的酒精浸泡30s,然后用0.2%HgCl2對(duì)外植體滅菌8min,可以使水杉的污染率和褐變率都保持較低水平,其污染率達(dá)到12.3%,褐變率為39.7

3、%,并且與其他處理組合比較差異性顯著。
   ⑵防褐變處理:水杉外植體接種后會(huì)褐變現(xiàn)象較為嚴(yán)重,添加附加物活性炭(AC)能相對(duì)降低褐變率。研究表明,添加0.9 g/L的活性炭對(duì)于防止外植體褐變效果最好,可以把褐變率降低到25.9%并保持較高的出芽率(21.5%)。
   ⑶水杉愈傷組織誘導(dǎo)及再分化:采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),在不同的激素種類(lèi)及濃度的處理中,水杉外植體大都能產(chǎn)生愈傷組織。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,采用培養(yǎng)基MS+2,4-D2.

4、0mg/L+NAA3.0mg/L+6-BA1.5mg/L,水杉愈傷組織誘導(dǎo)率為94.5%,初愈時(shí)間為20天左右;適宜愈傷組織再分化的最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.2 mg/L+6-BA1.5mg/L,出芽率為30.2%。
   ⑷水杉生根培養(yǎng):綜合生根率、平均根數(shù)、平均根長(zhǎng)三指標(biāo)試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析,有利于水杉植株生根的培養(yǎng)基配方組合為1/2MS+NAA3.0mg/L+IAA0.1mg/L,生根率為18.8%以上,培養(yǎng)30天后平均根數(shù)可達(dá)

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