1、硫是生物體內(nèi)必不可少的大量生命元素之一，它不僅在氨基酸，蛋白質和脂類的合成及功能形成上發(fā)揮重要作用，還參與生物體內(nèi)許多輔酶的合成作用。對根瘤菌而言，其對宿主的專一性正是由根瘤菌結瘤因子還原性末端的硫化修飾所決定的。
　　 在硫酸鹽同化途徑中，由硫化物(S2-)與O-乙酰絲氨酸(OAS)催化合成的半胱氨酸(Cys)所需的O-乙酰絲氨酸-（巰基）-裂解酶(OASTL)屬于5’-磷酸吡哆醛(PLP)依賴型酶家族，而pdxP編碼的是5’

2、-磷酸吡哆醇磷酸酶，它的作用是專一性的催化5’-磷酸吡哆醇(PNP)和5’-磷酸吡哆醛(PLP)脫磷酸變?yōu)檫炼叽己瓦炼呷?。通過對苜蓿根瘤菌的研究發(fā)現(xiàn)PdxP很可能是調節(jié)生物體內(nèi)PNP和PLP含量的限制性酶。
　　 本實驗首先利用質粒轉座子（pTnMod-RKm’）隨機插入到構建了費氏中華根瘤菌WGF03基因組中，構建了5000個突變體，然后通過對不同硫源利用的選擇性篩選，得到了20個與硫代謝相關突變體，之后通過基因測序和生物信息

3、學分析，獲得了一段基因序列與Sinorhizobium meliloti中編碼pyridoxine 5-phosphate phosphatase的pdxP gene在核苷酸水平上有87％的一致性，在氨基酸水平上有88％的相似性。
　　 本實驗利用自殺質粒pK18mob，運用同源單交換的方法構建了費氏中華根瘤菌WGF03pdxP的非極性突變體WTA和極性突變體WTB。通過測定突變體利用不同硫源的情況，發(fā)現(xiàn)突變體在以硫酸鹽，亞硫酸