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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)凋亡中前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)與炎癥因子表達(dá)的關(guān)系,以及替格瑞洛(Ticagrelor)干預(yù)的影響。
方法:
用50μg/ml的ox-LDL處理HUVECs不同時(shí)間(0h,12h,24h,36h,48h),運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(ELISA)的檢測(cè)方法分別檢測(cè)PCSK9、白
2、細(xì)胞介素6(IL-6)、單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)、C反應(yīng)蛋白(CRP)的mRNA和蛋白的表達(dá),以及核因子-κB(NF-κB)核位移。應(yīng)用Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染100nmol/L的PCSK9小分子干擾RNA(PCSK9 siRNA)進(jìn)入HUVECs6h后,再加入ox-LDL50μg/ml處理24h,以RT-PCR、ELISA的方法分別檢測(cè)PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、
3、CRP的mRNA和蛋白的表達(dá),以及NF-κB核位移。用50μg/ml的ox-LDL及不同濃度的Ticagrelor(40、60μmol/L)處理HUVECs24h,以RT-PCR、ELISA的方法分別檢測(cè)PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的mRNA和蛋白的表達(dá),以及NF-κB核位移。
結(jié)果:
在一定時(shí)間范圍內(nèi),隨著ox-LDL處理HUVECs時(shí)間的不斷增加,PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-
4、9、CRP的 mRNA和蛋白的表達(dá),以及NF-κB核位移逐漸增加(P<0.05)。PCSK9 siRNA轉(zhuǎn)染組,PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的mRNA和蛋白的表達(dá),以及 NF-κB核位移較陰性轉(zhuǎn)染組(NC)組明顯降低(P<0.05)。Ticagrelor能明顯降低PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP的mRNA和蛋白的表達(dá),以及NF-κB核位移,呈濃度依賴(lài)性(P<0.05)。
結(jié)論:
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