1、目的：研究GPER通過MAPK/Erk信號通路使Trim2高表達，從而降解凋亡蛋白Bim，促進他莫昔芬（tamoxifen）耐藥。
　　方法：通過免疫組化分析106例原發(fā)性乳腺癌及其經他莫昔芬治療后復發(fā)轉移的組織標本中 Bim和 GPER的表達情況，并分析它們的關系。前期研究發(fā)現(xiàn)GPER及其下游信號通路在乳腺癌他莫昔芬耐受中起到重要的作用，并進行cDNA芯片分析發(fā)現(xiàn)TRIM2是GPER的下游基因，通過QRT-PCR、Western

2、 Blot檢測人乳腺癌細胞MCF-7及其他莫昔芬耐藥株MCF-7R中的Bim及TRIM2表達情況。應用GPER特異性的激動劑G1及其特異性阻斷劑G15驗證芯片結果。小分子RNA干擾MCF-7中Bim基因并將Bim的cDNA導入MCF-7R后，再利用MTT和流式細胞術研究 Bim蛋白與乳腺癌細胞增殖及凋亡的關系。免疫共沉淀驗證 MCF-7R中TRIM2與Bim相互結合情況以及作用關系。利用MAPK/ERK信號通路的抑制劑U0126及PI3

3、k/AKT信號通路的抑制劑LY294002處理耐藥細胞，研究GPER調控TRIM2的分子機制。
　　結果：復發(fā)乳腺癌組織中Bim的表達水平明顯低于復發(fā)前組織（p<0.05），且Bim的表達與GPER有負相關性（p=0.0001）。耐藥細胞MCF-7R中Bim蛋白表達水平低于MCF-7細胞（p<0.05），且Bim是參與MCF-7R增殖與凋亡的重要因素。發(fā)現(xiàn)TAM作用于乳腺癌細胞后，Bim通過活化PARP和Caspase3使細胞凋亡

4、。MCF-7R細胞中TRIM2的表達水平明顯高于MCF-7細胞（p<0.05），且Trim2的表達受GPER/EGFR/Erk信號通路調控，并促使MCF-7R細胞中TRIM2與Bim緊密結合，使Bim蛋白量降低。干擾MCF-7R中的TRIM2后，Bim的蛋白量明顯升高且恢復其對他莫昔芬的敏感性。
　　結論：TAM激活GPER后，下游EGFR/ERK信號通路的活化使乳腺癌細胞中Trim2的表達升高，使其與促凋亡蛋白 Bim結合并促進