1、目的：先心病室間隔缺損(ventricular septal defect，VSD)簡稱室缺，是最常見的先心病之一，約占23～30%?；純撼錾笥捎诜窝h(huán)打開，使肺動脈壓力驟減，右室壓力也隨之減小，使左右室壓差顯著。當室間隔出現缺損時，則左室血液將有一部分經缺損流入右心室，長期左向右分流，使肺小動脈中層增生，內膜增厚，肺血管阻力進一步增加，形成肺動脈高壓，如果沒有及時治療，肺小動脈病變進行性加劇，形成不可逆性肺血管阻塞性病變，肺血管阻力

2、甚至超過體循環(huán)的阻力，導致右向左分流，患兒出現紫紺，即艾森曼格綜合癥。
　　肺動脈高壓(pulmonary arterial hypertension，PAH)是先心病室間隔缺損(VSD)最常見的并發(fā)癥。另外，VSD患兒在圍手術期可出現PAH危象，是圍手術期死亡的重要原因之一。國內對于低月齡、低體重的VSD合并PAH患兒的外科治療，與國際先進水平尚有相當大的差距，是當今我國小兒心外科的主要挑戰(zhàn)之一。
　　有研究報道先心病患兒

3、存在免疫功能低下和免疫功能紊亂，即存在Th1→Th2漂移，并且肺充血型先心病較肺缺血型先心病患兒免疫功能紊亂更為明顯。Th1、Th2及其相互之間的平衡在免疫應答中起著關鍵作用。在T細胞亞群分化過程中，轉錄因子具有重要的調節(jié)作用。轉錄因子T-bet和GATA-3分別特異性地表達于Th1和Th2，是決定Th0細胞向Th1細胞或Th2細胞分化的兩個關鍵且特異性轉錄因子。
　　實時熒光定量PCR是一種基于傳統(tǒng)PCR檢測方法上的新技術，它有

4、效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，具有高特異性和可靠性，實驗結果穩(wěn)定，重復性好等優(yōu)點。
　　方法：本實驗擬通過檢測小年齡、低體重室間隔缺損合并不同程度肺高壓患兒圍手術期外周血單核細胞(Peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)中轉錄因子T-bet mRNA和GATA-3 mRNA的表達水平，從調控轉錄水平探討Th1和Th2細胞在先天性室間隔缺損合并不同程度肺高壓圍術期免疫功能方法：201

5、1年3月至2011年12月在本院心臟外科住院接受先心病手術治療并符合以下條件的VSD合并不同程度PAH患者，入選標準：①所有病例均經體檢、輔助檢查及彩色心臟超聲檢查確診為先天性心臟病室間隔缺損患者，年齡1歲以內，體重＜10Kg；②嚴格按照納入標準選VSD合并輕度PAH(肺動脈壓/主動脈壓在0.3～0.45)、中度PAH(0.45～0.75)、重度PAH(＞0.75)以及未合并PAH者各10例，所有入選患兒均在體外循環(huán)開始前直接測壓，確定

6、肺高壓程度；③所有患兒其他臟器無嚴重疾病史，無其它缺氧相關疾病史，無嚴重感染和自身免疫性疾病史；④排除原發(fā)性肺動脈高壓；⑤本實驗經河北省兒童醫(yī)院倫理委員會批準，患兒家屬簽署知情同意書。
　　研究對象抽取外周靜脈血，采用SYBR GreenⅠ實時熒光定量RT-PCR技術檢測PBMCs中轉錄因子T-bet mRNA和GATA-3 mRNA的表達水平。所有數據應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析，多組間比較用單因素方差分析。P＜0.05有統(tǒng)

7、計學意義。
　　結果：
　　1.先心病室間隔缺損合并不同程度PAH患兒(共4組)之間的統(tǒng)計比較結果如下：
　　1.1 T-bet基因的統(tǒng)計結果：無PAH組、輕度PAH組、中度PAH組、重度PAH組△Ct值分別為5.74±2.15、6.93±1.45、7.51±1.96、7.43±1.31。先天性室間隔缺損合并中度PAH組T-bet基因的表達較末合并PAH組低(P=0.024＜0.05)；先天性室間隔缺損合并重度PAH組

8、T-bet基因的表達較未合并PAH組低(P=0.033＜0.05)；其余各組之間無差別(P＞0.05)。
　　1.2 GATA-3基因的統(tǒng)計結果：無PAH組、輕度PAH組、中度PAH組、重度PAH組△Ct值分別為3.79±2.10、5.43±1.29、5.36±1.36、5.35±1.20。先天性室間隔缺損合并輕度PAH組GATA-3基因的表達較未合并PAH組低(P=0.025＜0.05)；先天性室間隔缺損合并中度PAH組GATA

9、-3基因的表達較未合并PAH組低(P=0.018＜0.05)；先天性室間隔缺損合并重度PAH組GATA-3基因的表達較未合并PAH組低(P=0.020＜0.05)；其余各組之間無差別(P＞0.05)。
　　2.先心病室間隔缺損在圍手術期(術前、術后1d、術后3d、術后7d)，各組之間的統(tǒng)計比較結果如下：
　　2.1 T-bet基因的統(tǒng)計結果：先心病室間隔缺損在圍手術期術前、術后1d、術后3d、術后7d△Ct值分別為5.97±

10、1.49、6.74±2.29、7.30±1.22、7.17±1.27。術前患者T-bet基因的表達較術后3d患者低(P=0.045＜0.05)；術前患者T-bet基因的表達較術后7d患者低(P=0.002＜0.05)；術后1d患者T-bet基因的表達較術后7d患者低(P=0.038＜0.05)；其余各組之間無差別(P＞0.05)。
　　2.2 GATA-3基因的統(tǒng)計結果：各組之間均無統(tǒng)計學差別(P值均＞0.05)。
　　結論

11、：本研究從轉錄水平上提示先天性室間隔缺損合并不同程度PAH患兒的在圍手術期存在免疫功能紊亂。先天性室間隔缺損合并中、重度PAH組T-bet基因的表達較未合并PAH組低，即先天性室間隔缺損合并中、重度PAH組患兒Th1細胞數量減少的可能性大，可能存在細胞免疫下降；先天性室間隔缺損合并輕、中、重度PAH組GATA-3基因的表達較未合并PAH組低，即先天性室間隔缺損合并輕、中、重度PAH組患兒存在Th2細胞數量減少的可能性大，可能存在體液免疫