1、本文將金屬硫蛋白基因通過同源重組整合到釀酒酵母染色體上，篩選得到了一株對多種重金屬具有較好耐受性和吸附能力的基因工程菌4126-pgk-cup1-rDNA，并利用響應面法對其吸附Cu(Ⅱ)和Cr(Ⅵ)的條件參數(shù)進行了優(yōu)化研究。
　　通過PCR的方法獲得了Saccharomyces cerevisiae288c攜帶啟動子的金屬硫蛋白基因pcup1和3-磷酸甘油酸激酶啟動子基因pgk，以及用于介導重組表達的rDNA基因。以pFA6a質

2、粒為基礎，以rDNA為同源臂構建了自身攜帶啟動子的金屬硫蛋白多拷貝整合表達載體pFA6a-pcup1-rDNA和pgk啟動子的金屬硫蛋白多拷貝整合表達載體pFA6a-pgk-cup1-rDNA。將兩個載體分別轉入S.cerevisiae4126，得到兩株基因工程菌4126-pcup1-rDNA(4126pr)和4126-pgk-cup1-rDNA(4126pcr)。
　　重金屬耐受性研究發(fā)現(xiàn)，4126pr僅對Cu(Ⅱ)的耐受性有明

3、顯提高;4126pcr對Cu(Ⅱ)和Cr(Ⅵ)都表現(xiàn)出顯著優(yōu)于其他菌株的耐受能力。重金屬吸附實驗結果顯示，4126pr只在生長態(tài)吸附Cu(Ⅱ)的實驗中表現(xiàn)出優(yōu)于出發(fā)菌的吸附能力;4126pcr對Cu(Ⅱ)的吸附能力(4.19 mg/g)相比出發(fā)菌(1.16 mg/g)提高了近4倍;4126pcr對Cr(Ⅵ)的還原速率和對總鉻的吸附能力相比出發(fā)菌分別提高了40％和13％。實驗結果表明，4126pcr比4126pr在重金屬污染處理應用上具有

4、更大的優(yōu)勢。傅里葉變換紅外光譜(FTIR)分析結果顯示，4126pcr吸附Cu(Ⅱ)的過程中主要參與的官能團為羧基，氨基，羥基;吸附Cr(Ⅵ)的過程中，主要參與的官能團除以上官能團外，磷酸基和酰胺基也起到了一定作用。
　　通過響應面法分別對4126pcr吸附Cr(Ⅵ)和Cu(Ⅱ)的條件進行優(yōu)化，得出其最優(yōu)吸附條件分別為:在pH2，溫度40℃，吸附劑添加量為7.21 g/L，Cr(Ⅵ)初始濃度為45 mg/L的條件下，Cr(Ⅵ)去除