1、研究目的： 國(guó)內(nèi)外大量研究表明，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)基因發(fā)生單核苷酸突變而導(dǎo)致的氨基酸取代是葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的主要原因。其突變類型有明顯的地區(qū)性。在非洲，特別是撒哈拉以南地區(qū)，低活性G6PD等位基因主要是G6PD A-；地中海和中東地區(qū)主要為G6PD Med變型；而中國(guó)人群中導(dǎo)致患G6PD缺乏癥的十多種G6PD變型中以G1376T和G1388A為主要的變異型。本研究在DNA水平對(duì)海南黎族人群G6PD基因

2、的多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行進(jìn)一步的分析，以確定海南黎族G6PD基因的分子特征。 研究方法： 采用NBT定量法篩查海南黎族人群中的G6PD缺乏者；采用擴(kuò)增阻礙突變系統(tǒng)法對(duì)患G6PD缺乏癥的男性患者進(jìn)行G6PD突變位點(diǎn)G1376T和G1388A的篩查；運(yùn)用生物信息學(xué)軟件分析G6PD基因部分區(qū)域的測(cè)序結(jié)果；毛細(xì)管電泳對(duì)G6PD下游19kb區(qū)的三個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)進(jìn)行電泳分析，分析檢驗(yàn)其與G6PD多態(tài)性位點(diǎn)的連鎖情況。 研究結(jié)果：

3、 1.在714例海南籍男性黎族人中有86例G6PD缺乏癥患者，發(fā)病率為12.05％。 2.隨機(jī)抽取G6PD缺乏樣本50例測(cè)序。用ARMS法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)G6PD G1376T 27例(54.0％)，G6PD G1388A 12例(24.0％)。 3.隨機(jī)抽取G6PD正常海南黎族、漢族男性各50例作為50例海南黎族G6PD缺乏癥男性患者的對(duì)照。測(cè)序得到下列結(jié)果： (1)在海南黎族G6PD缺乏樣本中，除了27例G1376

4、T變型和12例G1388A變型以外，還發(fā)現(xiàn)有3例G6PD cDNA第1311位C突變?yōu)門(C1311T)，它們?nèi)慷及橛蠭VS-11T93C突變，即C1311T/IVS-11T93C復(fù)合突變。 (2)在海南黎族G6PD正常樣本中，發(fā)現(xiàn)有12例C131lT/IVS-11T93C復(fù)合突變。(3)在海南漢族G6PD正常樣本中，發(fā)現(xiàn)有5例C1311T/IVS-11T93C復(fù)合突變。 (4)海南漢族、黎族G6PD正常樣本中各發(fā)現(xiàn)兩

5、例G6PD內(nèi)含子5第636或637位核苷酸T缺失(IVS-5 636or637 T del)。 4.對(duì)上述150例樣本進(jìn)行G6PD下游三個(gè)微衛(wèi)星分型。觀察到 G6PD A1376T突變與172bp的微衛(wèi)星(AC)n連鎖，G6PD C1311T/IVS-11T93C復(fù)合突變與176bp的微衛(wèi)星(AC)n連鎖。 結(jié)論： 研究結(jié)果表明海南黎族人群G6PD基因最常見的突變型是G1376T和G1388A；同義突變 C131