1、目的：前期通過對我國優(yōu)秀長跑運動員mtDNA全基因組掃描，課題組發(fā)現(xiàn)7個多態(tài)位點可以作為長跑運動員選材的分子標記。本研究通過與有氧運動能力相關指標的關聯(lián)性分析，以及質(zhì)粒構建、細胞轉染、基因表達等方法探討上述mtDNA分子標記的調(diào)控機理。
　　方法：(1)用遞增負荷跑臺測試79名優(yōu)秀長跑女運動員的最大攝氧量、無氧閾等指標，用微測序反應對受試者7個mtDNA多態(tài)位點進行分型，并與有氧運動能力進行關聯(lián)性分析；(2)全基因合成mtDNA非

2、編碼區(qū)mt235、mt514-515、mt16183、mt16290和mt16319位點片段，連接載體，構建重組質(zhì)粒，檢測轉染重組質(zhì)粒24h后細胞內(nèi)報告基因的表達；(3)PCR擴增和定點突變mtDNA編碼區(qū)mt8794和mt12338位點片段，連接到真核表達載體，構建重組表達質(zhì)粒，檢測重組質(zhì)粒轉染細胞48h的蛋白表達，同時檢測血液白細胞ATP6和ND5的基因表達水平。
　　結果：(1)mtDNA7個多態(tài)位點不同基因型的有氧運動能力

3、表型之間無顯著性差異；(2)除mt16290外，mtDNA非編碼區(qū)多態(tài)位點質(zhì)粒轉染細胞報告基因的表達量在不同基因型之間有顯著差異；與空載體相比，攜帶mt16319A的質(zhì)粒轉染細胞熒光素酶mRNA的表達顯著下降，而mt16290的兩種質(zhì)粒對報告基因的表達無顯著性影響；(3)轉染重組質(zhì)粒293T細胞48h后ND5 mRNA及蛋白表達量無顯著性差異；mt8794和mt12338對應的血液白細胞ATP6和ND5的蛋白含量無顯著性差異，但ATP6

4、 mRNA表達水平存在顯著差異。
　　結論：(1)mtDNA7個多態(tài)位點的不同基因型與優(yōu)秀女長跑運動員有氧運動能力表型之間無顯著關聯(lián)性，表明運動能力并非單個多態(tài)位點所能決定，是與其它因素共同作用的結果。(2)mt235、mt514-515、mt16183和mt16319多態(tài)位點影響下游基因的表達活性，可能是影響人有氧運動能力的重要調(diào)控因素。mt16290多態(tài)位點對下游基因轉錄和翻譯無顯著影響。(3)mt8794和mt12338多態(tài)