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1、微流控芯片技術(shù)(Microfluidics)是一種在微通道內(nèi)對(duì)微流體進(jìn)行精密操控的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。該技術(shù)可將化學(xué)、生物等領(lǐng)域中所涉及的多種反應(yīng)步驟高度集成在一塊微小的芯片上(μm2~cm2),以其精確的樣本控制、微量的試劑損耗、良好的生物相容性、較高的反應(yīng)效率和分析通量、較低的生產(chǎn)成本、高度集成自動(dòng)化等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于基因組測(cè)序、疾病診斷與治療、藥物合成和篩選等領(lǐng)域,是21世紀(jì)最為重要的前沿性分析技術(shù)之一。
隨著精準(zhǔn)醫(yī)療計(jì)劃的啟動(dòng),
2、人類對(duì)腫瘤的探索已不僅僅局限于腫瘤大體表型的研究,基于腫瘤基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白組等微量樣本分子層面的深入研究將有助于從根本上發(fā)現(xiàn)腫瘤的衍生機(jī)制、進(jìn)化過(guò)程和特異靶點(diǎn)。那么,如何對(duì)這些微量樣本予以更準(zhǔn)確、更高效、更廉價(jià)的檢測(cè)和實(shí)驗(yàn),是腫瘤學(xué)研究需要解決的首要問(wèn)題。
本研究以微流控芯片技術(shù)的設(shè)計(jì)和加工為出發(fā)點(diǎn),應(yīng)用模塑法成功制備了PDMS材料的液滴微流控芯片并搭建了標(biāo)準(zhǔn)化的液滴微流控芯片系統(tǒng);通過(guò)液滴制備實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)在確定微通道結(jié)構(gòu)和
3、兩相溶液粘度系數(shù)的情況下,影響液滴制備的因素主要為連續(xù)相與分散相的流速比例,并確定了相關(guān)液滴制備屬性的預(yù)測(cè)公式以對(duì)該系統(tǒng)進(jìn)行靈活的控制;應(yīng)用該系統(tǒng)可制備高度均一的液滴(CV%<5%),同時(shí)液滴體積靈活可控(0.81 pL~0.26 nL,11.56μm~78.94μm),且較快的制備速率使其具有高通量應(yīng)用特性(103~106 droplets/min);最后,我們通過(guò)應(yīng)用該系統(tǒng)對(duì)微量核酸進(jìn)行qPCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該系統(tǒng)與傳統(tǒng)qPCR實(shí)驗(yàn)
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