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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究源于白眉蝮蛇的去整合素rAdinbitor的抗腫瘤作用,并探討其抑制腫瘤生長(zhǎng)作用的機(jī)制,為其以后的臨床試驗(yàn)提供必要的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。
方法:大量培養(yǎng)含有前期已構(gòu)建好的rAdinbitor基因的E. coli BL21,超聲破碎細(xì)菌后,提取菌體總蛋白,利用His-BindColumn親和層析技術(shù)對(duì)rAdinbitor進(jìn)行純化。用18%Tricine-SDS-PAGE對(duì)提取的總蛋白和純化后的rAdinbitor進(jìn)行鑒
2、定。將80只BALB/C小鼠隨機(jī)分為口服給藥組和肌肉注射兩組,雌雄各半。每組再隨機(jī)分為5小組,也雌雄各半。每只小鼠右腋皮下接種1×106個(gè)H22肝癌細(xì)胞以制備肝癌小鼠模型。rAdinbitor的治療劑量分別為0.5mg/kg體重、1.25mg/kg體重和5mg/kg體重,陰性對(duì)照組給予生理鹽水(0.2ml/kg體重),陽性對(duì)照組給予重組人血管內(nèi)皮抑素(1.65mg/kg體重)。每天給藥一次。實(shí)驗(yàn)第21天處死動(dòng)物,取瘤稱重。鏡下觀察HE染
3、色的腫瘤組織切片,并計(jì)數(shù)血管數(shù)量。
結(jié)果:rAdinbitor在E.coli BL21中得到高表達(dá)。通過His-BindColumn親和層析獲得大量純化的rAdinbitor蛋白。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示,與生理鹽水陰性對(duì)照組相比,純化的rAdinbitor各劑量組的瘤重和血管數(shù)明顯下降,有顯著性差異(P<0.05);與重組人血管內(nèi)皮抑素組相比各治療組無明顯差異。
結(jié)論:純化的蛇源rAdinbitor對(duì)H22肝癌細(xì)胞的生
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