1、雜種優(yōu)勢利用是提高油菜產量、選育優(yōu)質高抗品種的主要途徑。親本間的遺傳差異則是產生雜種優(yōu)勢的遺傳基礎。然而，甘藍型油菜起源發(fā)生較晚，其種質資源的遺傳基礎遠不及白菜型油菜等蕓苔屬其它種，我國的甘藍型油菜系由歐洲和日本引進，種質資源顯得更為匱乏。這嚴重制約了我國油菜育種工作的進一步發(fā)展。 自1935年日本學者Nagahara闡明甘藍型油菜是由白菜型油菜與甘藍天然雜交并二倍化后進化而來以來，各國學者開始了利用白菜與甘藍人工合成甘藍型油菜

2、的研究。與甘藍型油菜不同，白菜型油菜與甘藍均具有十分豐富的遺傳變異，我國更是白菜型油菜的起源中心之一。因而，開展對甘藍型油菜人工合成種的利用研究在油菜育種中是一項很重要且必要的工作。 本研究利用RAPD和SSR技術對本課題育成的甘藍型油菜雜交種親本種質資源進行遺傳多樣性評估；同時，對自己合成及德國引進的甘藍型油菜人工合成種的種質資源也進行分子標記遺傳多樣性評估，利用系統(tǒng)進化樹分析軟件構建人工合成種SSR標記進化樹，并根據(jù)種質資源

3、評估和進化樹分析結果，提出利用人工合成種拓展甘藍型油菜及雜交種親本種質資源的方法；對上述人工合成種種質資源的部分有利用價值的性狀進行了考察，對具有波里馬細胞質雄性不育(polCMS)恢復基因Rfp的人工合成種進行恢復基因等位性鑒定，并篩選與Rfp連鎖的分子標記。此外，還對AFLP技術進行了改進。主要研究結果如下： 1.甘藍型油菜雜交種親本種質資源分子標記評價 RAPD、SSR和ISSR聚類結果均表明，大部分甘藍型油菜雜交

4、種親本均聚在一個大的類中，雜交種親本種質資源的遺傳基礎狹窄，不育系的種質資源比恢復系的種質資源的遺傳基礎更狹窄。同時，采用輪回選擇方法育成親本的遺傳變異大于常規(guī)雜交或回交方法育成親本的遺傳變異，2份人工合成種對照品系與甘藍型油菜雜交種親本的遺傳距離很大。通過輪回選擇育種方法可以有效利用現(xiàn)有甘藍型油菜的種質資源，而將人工合成種特異種質導入甘藍型油菜則可從根本上解決現(xiàn)有甘藍型油菜種質資源匱乏的現(xiàn)狀。 2.甘藍型油菜人工合成種種質資源

5、的評價與利用 對人工合成種脂肪酸組成、自交不親和性、抗(耐)菌核病性等性狀進行分析與鑒定，獲得具有高油酸、高亞油酸、高芥酸、低亞麻酸含量等品質性狀的材料，自交不親和品系，抗(耐)菌核病品系，無蠟質品系以及核不育品系等特殊材料。不斷回交獲得不育性徹底的15個polCMS不育系。創(chuàng)建了一個用于長期改良目的的人工合成種輪回選擇群體。 在RAPD和SSR聚類中，大部分甘藍型油菜對照品種集中分布于一個大類中，甘藍型油菜品種(系)的

6、遺傳基礎較窄。國外甘藍型油菜品種(系)遺傳多樣性比國內甘藍型油菜品種(系)豐富，冬性品種、半冬性品種和春性品種在遺傳多樣性豐富程度的表現(xiàn)為冬性品種＞春性品種＞半冬性品種。98份人工合成種則分布于其它類，其遺傳多樣性遠大于甘藍型油菜對照品種的遺傳多樣性。 主成分分析表明人工合成種與甘藍型油菜品種(系)有顯著的差別，兩者各為一類，有少數(shù)交叉，表明甘藍型油菜可能由少數(shù)白菜型油菜與甘藍天然雜交并二倍化而來；SSR比RAPD主成分分析散點

7、圖分布更勻稱、分散，SSR比RAPD分析結果更準確、可靠。 在SSR進化樹上，46份甘藍型油菜品種(系)中有43份處于進化樹的同一分枝上，該分枝又分化為兩個分枝，其中21份中國甘藍型油菜品種、2份德國甘藍型油菜品種以及全部3份日本甘藍型油菜品種位于第一個分枝，其余17份國外甘藍型油菜品種以及3份人工合成種位于第二個分枝，且第二分枝的相對進化時間比第一分枝的相對進化時間要早，符合甘藍型油菜首先起源于歐洲然后傳入亞洲的歷史。

8、 有6份人工合成種與甘藍型油菜品種(系)在進化樹上位于同一分枝，1份與甘藍型油菜品種(系)在進化樹上位于相鄰近的分枝，其余91份人工合成種在進化樹上與甘藍型油菜品種(系)相距較遠。 探討了加快甘藍型油菜人工合成種在油菜育種中利用的不同方法。 3.甘藍型油菜polCMS育性恢復基因的分子標記 用RAPD、SSR和AFLP技術篩選到與polCMS育性恢復基因Rfp連鎖的2個分子標記，這些標記分布于Rfp的兩側，其中，