1、分類(lèi)號(hào)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的‘谷了刁卯勺砂白se基因和綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)化碰柑的研究Agrobaeterium一mediatedTransformationofPonkanMandarinwithCGI一400.R八恤seandGFPGene研究生姓名:王曉培指導(dǎo)教師:郭文武教授授授教教指導(dǎo)小組成員:鄧秀新孫中海徐娟程運(yùn)江副教授副教授專(zhuān)業(yè):果樹(shù)學(xué)獲得學(xué)位名稱(chēng):農(nóng)學(xué)碩士研究方向:生物技術(shù)獲得學(xué)位時(shí)間:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)

2、學(xué)院作物遺傳改良國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室二O一O年六月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2010屆碩士學(xué)位論文2.2.2.3侵染與共培養(yǎng)....................................................……132.2.2.4篩選培養(yǎng)...............................................................................................一132.2

3、.2.5再生與移栽..........................................................................................……132.2.3GFP檢測(cè).............................................……，..................................................……142.2.4

4、柑橘基因組DNA提取...............................................................................……142.2.5PCR檢測(cè).....................................................................................................……153.1以實(shí)生苗上胚軸切段

5、和根軸聯(lián)結(jié)體為外植體的CGI一400~RNAsE基因的遺傳轉(zhuǎn)化..............................................................................................................................……173.1.1檢柑實(shí)生苗上胚軸切段和根軸聯(lián)結(jié)體的轉(zhuǎn)化再生.................................

6、.……173.1.2再生率與轉(zhuǎn)化率統(tǒng)計(jì)..............……，.............................................................……183.1.3轉(zhuǎn)基因植株的PCR鑒定............................................................................……193.2以實(shí)生苗上胚軸切段和根軸聯(lián)結(jié)體為外植體的

7、GFP基因的遺傳轉(zhuǎn)化.......……203.2.1檢柑實(shí)生苗上胚軸切段和根軸聯(lián)結(jié)體的轉(zhuǎn)化再生二，...............................……203.2.2抗性芽的熒光檢測(cè)......................................................................................……213.2.3再生率和轉(zhuǎn)化率評(píng)價(jià)...................

8、...............................................................……214討論.............................................................……，......................................................……234.1影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)的碰柑的遺傳轉(zhuǎn)化的因素.......

9、.............................................……234.1.1基因型的影響..............................................................................................……234.1.2外植體狀態(tài)的影響.................................................

10、.....................................……244.1.3適宜的再生和培養(yǎng)方式.......................................................................……，..…254.2GFP在遺傳轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用......................................................................

11、..........……26參考文獻(xiàn)......................................................................................................................……27致謝..............................................................................