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![抗CD146抗體在異基因造血干細胞移植后急性移植物抗宿主病中的作用及機制研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/11/11/70987b3c-27e5-40ff-878f-e3105ee83b34/70987b3c-27e5-40ff-878f-e3105ee83b341.gif)
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文檔簡介
1、目的:探討抗CD146抗體AA98在異基因造血干細胞移植后急性移植物抗宿主病(acutegraft versus host disease,aGVHD)進程中的作用。
方法:將純化的AA98抗體以及對照抗體AA1采用清除內毒素的柱子進行內毒素清除,檢測清除前后內毒素水平,并對成功清除內毒素的抗體測定濃度。BALB/c(H2Kd)受體小鼠接受1050cGy全身性致死性輻照,通過尾靜脈注射的方法輸注1×107C57BL/6(H2K
2、b)小鼠來源的骨髓細胞和5×106全脾細胞,建立aGVHD模型。于異基因造血干細胞移植后第5天,流式檢測小鼠臟器中CD146的表達。從移植第0天(day0)至移植后第6天(day6)每隔一天給小鼠腹腔注射AA98抗體(200μg/只),對照組注射相同劑量的IgG抗體或AA1抗體(抗CD146對照抗體)。觀察小鼠生存和體重變化,記錄aGVHD積分。移植后第7天采用流式細胞術檢測受體小鼠的脾臟、肝臟、肺和小腸四個臟器中的免疫細胞的表型。
3、r> 結果:有效清除了AA1和AA98抗體中的內毒素,使內毒素水平降到了10EU/ml以內,得到可用于注射aGVHD小鼠的抗體。aGVHD小鼠臟器中CD146的表達顯著高于骨髓移植對照組。aGVHD生存實驗表明,AA98能顯著抑制異基因造血干細胞移植后aGVHD的發(fā)展,延長aGVHD小鼠的生存但不能阻止aGVHD的發(fā)生:AA98顯著延長aGVHD小鼠存活時間;顯著減輕aGVHD小鼠的體重下降;減輕小鼠 aGVHD臨床癥狀,降低臨床積分
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