1、由于抗菌藥物的長期不合理使用，臨床中耐藥菌株不斷地出現，導致常用的有效抗菌藥物療效降低甚至失效，然而，細菌的耐藥現象并不只局限于抗生素，早已擴展到了消毒劑。與耐抗生素菌株一樣，由于畜牧業(yè)、食品生產企業(yè)、醫(yī)療衛(wèi)生機構及社區(qū)家庭中廣泛地不合理地使用著消毒劑，抗消毒劑菌株也陸續(xù)出現。畜牧業(yè)中，養(yǎng)殖廠是應用消毒劑最頻繁，使用量最大的場所，值得注意的是中低效消毒劑在低于最小殺菌濃度時，長期使用亞致死劑量可能促進細菌生態(tài)學變化，誘導其耐藥性的產生。

2、這種情況稱為選擇性壓力，是細菌對消毒劑耐藥的主要原因。雖然其耐藥性嚴重程度尚不及抗菌藥物的耐藥性，但也值得引起人們的重視。本試驗分別以臨床分離大腸桿菌和人工誘導的大腸桿菌作為研究對象，對消毒劑與抗菌藥物交叉耐藥機制進行了初步研究，旨在為臨床使用消毒劑奠定理論基礎。
　　 1、臨床分離大腸桿菌對抗菌藥物與消毒劑交叉耐藥性分析
　　 將實驗室鑒定保存的104株臨床分離大腸桿菌作為受試菌株，通過K-B紙法檢測受試菌株對氧氟沙星

3、、環(huán)丙沙星、慶大霉素、磺胺嘧啶等12中抗生素的耐藥情況。同時，采用體外抑菌試驗進行消毒劑（苯扎溴銨和醋酸氯己定）敏感性檢測。確定臨床菌株已對消毒劑有一定的耐藥性。
　　 結果:104株大腸桿菌對抗生素的耐藥率分別為氨芐西林87.5％氧氟沙星26.8％左氧氟沙星29.6％環(huán)丙沙星75％慶大霉素67.3％諾氟沙星29.6％氟啶酸24.3％洛美沙星11.5％氟羅沙星16.4％加替沙星19.7％磺胺嘧啶95.2％恩諾沙星20％;消毒劑對

4、臨床菌株的最小抑菌濃度明顯高于質控菌株。
　　 結論:臨床分離菌株對抗菌藥物產生耐藥性的同時對消毒劑也有一定的抗藥性。結果提示臨床中應合理使用消毒劑，對消毒劑耐藥機制的研究應該受到重視。
　　 2、臨床分離大腸桿菌消毒劑-磺胺耐藥基因qacE△1-sulⅠ的檢測
　　 利用細菌基因組DNA提取試劑盒提取104株受試菌株的DNA，以DNA樣品作為模板通過PCR方法檢測消毒劑-磺胺耐藥基因qacE△1-sulⅠ的存在

5、情況。
　　 結果:消毒劑-磺胺耐藥基因qacE△1-sulⅠ檢出率高達95.19％。
　　 結論:獸醫(yī)臨床中已經存在了攜帶消毒劑耐藥基因的大腸桿菌，而且耐藥基因檢出率很高，提示臨床應注意合理使用消毒劑。同時該基因同時編碼消毒劑與磺胺類藥物的耐藥說明消毒劑耐藥性與抗菌藥物耐藥性之間存在相關性，值得我們注意是qacE△1能夠編碼外排泵這為今后交叉耐藥機制的研究奠定基礎。
　　 3、人工誘導耐藥菌株對消毒劑和抗菌藥物

6、交叉耐藥性分析
　　 以大腸桿菌質控菌ATCC25922作為研究對象，采用多步法分別以亞抑菌濃度(1/2MIC)的消毒劑和抗菌藥物為起點進行體外誘導，得到耐藥性穩(wěn)定的菌株。通過體外抑菌試驗檢測誘導前后消毒劑和抗菌藥物對受試菌株的最小抑菌濃度(MIC)變化情況。
　　 結果:苯扎溴銨和戊二醛誘導前后除自身耐藥外MIC變化最大的是土霉素增加500倍，其他抗菌藥物MIC也有較高程度的增加;抗菌藥物誘導前后消毒劑MIC變化最明顯

7、的是苯扎溴銨增加64倍，戊二醛MIC變化相對較小，同時其他抗菌藥物的MIC也發(fā)生了較大的變化。
　　 結論:單一藥物能夠誘導大腸桿菌產生多重耐藥性，人工誘導菌株對消毒劑產生耐藥性的同時對多種抗菌藥物產生了耐藥性，反過來也成立，這說明細菌消毒劑耐藥與抗菌藥物耐藥存在相關性。
　　 4、誘導前后外排泵基因acrA、mdfA表達量的研究
　　 通過試劑盒提取受試菌株的RNA，轉錄成cDNA，利用熒光定量PCR技術檢測外

8、排泵acrA、mdfA基因mRNA表達水平，旨在說明消毒劑與抗菌藥物交叉耐藥性與外排泵acrA、mdfA基因之間的關系。
　　 結果:苯扎溴銨誘導菌株acrA表達量增加約3.6倍，mdfA基因表達量增加約1.9倍;戊二醛增加倍數相對較小;喹諾酮類藥物環(huán)丙沙星誘導后菌株A環(huán)acrA基因表達量變化最大，約為ATCC25922的9.5倍，mdfA基因表達量增加約6倍;其他抗菌藥物增加倍數相對較小。
　　 結論:誘導前后大腸桿菌