1、日本腦炎病毒(JEV)是在世界上最重要的病毒性腦炎病原體之一。盡管通過(guò)疫苗接種和改善個(gè)人衛(wèi)生，已經(jīng)大大減少了乙腦病例數(shù)量，但它仍然是一個(gè)公共衛(wèi)生問(wèn)題。研究顯示，2006-2009年期間每年全球約有67900例乙腦病例發(fā)生，其中50％（約33，900例）發(fā)生在中國(guó)。我國(guó)湖南省自50年代起一直是乙腦的流行區(qū)，1951～2000年乙腦年平均發(fā)病率為5.82/10萬(wàn)，在2013年7月湖南省公布的乙腦報(bào)告病例中，懷化市報(bào)告乙腦發(fā)病數(shù)列居前位。懷化

2、市位于湖南省西部偏南，屬中亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū)，四季分明，光熱資源豐富，雨量充沛，為三帶喙庫(kù)蚊的繁殖提供了良好的孳生環(huán)境。近年來(lái)，極少有研究針對(duì)該地區(qū)的乙腦媒介三帶喙庫(kù)蚊的密度、季節(jié)消長(zhǎng)等生態(tài)學(xué)特征進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查且對(duì)該地區(qū)乙腦病毒流行株缺乏深入研究。
　　本研究，通過(guò)對(duì)懷化地區(qū)蚊蟲(chóng)多樣性特征、三帶喙庫(kù)蚊種群季節(jié)消長(zhǎng)、攜帶病原體情況的調(diào)查，了解該地區(qū)主要傳播媒介的種群分布特征、目前流行的乙腦病毒株的基因型別及分子特征，為該地區(qū)乙腦的防控和

3、流行趨勢(shì)的預(yù)測(cè)提供重要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　　通過(guò)蚊蟲(chóng)種群密度現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，掌握了當(dāng)?shù)匚孟x(chóng)種群密度及季節(jié)消長(zhǎng)等資料，運(yùn)用RT-PCR的方法，分段設(shè)計(jì)引物、擴(kuò)增、測(cè)序、拼接，得到了蚊和豬體內(nèi)乙型腦炎病毒序列，采用最大簡(jiǎn)約法、最大似然法和貝葉斯法，對(duì)蚊蟲(chóng)和豬體內(nèi)分離湖南懷化株病毒基因與目前Genbank中登錄的覆蓋基因Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅴ型5個(gè)基因型別的乙腦病毒序列進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析，獲得如下結(jié)果。
　　湖南懷化蚊種構(gòu)成比較簡(jiǎn)單，三帶

4、喙庫(kù)蚊和中華按蚊均為當(dāng)?shù)氐膹V布種，特別是在豬圈和人居環(huán)境采集的蚊蟲(chóng)以三帶喙庫(kù)蚊構(gòu)成比最高，占總捕獲蚊蟲(chóng)數(shù)的94.2％～98.6％。三帶喙庫(kù)蚊活動(dòng)時(shí)間較長(zhǎng)，季節(jié)分布曲線呈單峰狀態(tài)，8月下旬出現(xiàn)高峰期，9月上旬密度開(kāi)始下降。
　　本研究首次從懷化地區(qū)自然界乙腦傳播循環(huán)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)——媒介蚊蟲(chóng)和豬體內(nèi)分離到乙腦病毒，蚊蟲(chóng)感染乙腦病毒的最低感染率分別為1∶3858 and1∶2381，豬的乙腦病毒感染率為16.42％，經(jīng)鑒定，湖南懷化地區(qū)蚊

5、蟲(chóng)和豬體內(nèi)分離的乙腦病毒均為基因Ⅲ型乙腦病毒。
　　新分離蚊蟲(chóng)體內(nèi)湖南懷化株病毒株與JEV SA14、SA-14株具有基因序列同源性。湖南懷化豬源性JEV病毒株在進(jìn)化關(guān)系上與臺(tái)灣分離株TIPI、日本分離株JaGAr01和中國(guó)福建分離株YLG株親緣關(guān)系最近。盡管懷化蚊蟲(chóng)體內(nèi)分離乙腦病毒與SA14-14-2株氨基酸比對(duì)結(jié)果顯示，在序列E基因區(qū)段存在11個(gè)氨基酸位點(diǎn)差異，位于E304和E335位點(diǎn)，能影響病毒抗原抗體結(jié)合的半胱氨酸則未發(fā)

6、生變化，沒(méi)有發(fā)生決定抗原性的關(guān)鍵位點(diǎn)改變，因此懷化株乙腦病毒抗原性與疫苗株SA-14-14-2沒(méi)有差異，同時(shí)，由于乙腦病毒抗原性相關(guān)的關(guān)鍵位點(diǎn)未發(fā)生改變，因此理論上當(dāng)前使用的疫苗株SA-14-14-2能夠保護(hù)我國(guó)湖南懷化株乙腦病毒的感染。
　　新分離蚊蟲(chóng)體內(nèi)湖南懷化株株乙腦病毒與JEV SA14、SA-14株具有基因序列同源性。湖南懷化豬源性JEV病毒株在進(jìn)化關(guān)系上與臺(tái)灣分離株TIPI、日本分離株JaGAr01和中國(guó)福建分離株YL