安徽地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎血清學(xué)調(diào)查及APP分離與生物學(xué)特性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、豬傳染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP),是由胸膜肺炎放線(xiàn)桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一種豬高度傳染性呼吸道疾病,嚴(yán)重危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。為了解安徽地區(qū)PCP的流行情況,提高APP亞臨床感染的檢出率和細(xì)菌分離率,并研究分離株的生物型特性,本試驗(yàn)將從以下幾個(gè)方面開(kāi)展。
  運(yùn)用ApxIV-ELISA試劑盒檢測(cè)1288

2、份血清感染抗體,了解安徽地區(qū)總體感染情況及流行特點(diǎn)。結(jié)果顯示,APP感染抗體總陽(yáng)性率為26.40%(340/1288),豬場(chǎng)感染率為78.37%(58/74),母豬/后備母豬/公豬 APP感染抗體陽(yáng)性率(45.47%)高于哺乳仔豬(28.02%)、保育豬(6.16%)、育肥豬(7.20%);夏季(41.42%)高于春季(29.75%)、秋季(26.35%)、冬季(19.26%),淮北地區(qū)(30.73%)和江淮地區(qū)(28.57%)高于皖南

3、地區(qū)(13.77%),中型豬場(chǎng)(47.16%)高于大型豬場(chǎng)(19.28%)和小型豬場(chǎng)及散養(yǎng)戶(hù)(23.15%)。安徽地區(qū) PCP的流行特點(diǎn),為制定有效防控措施提供了科學(xué)依據(jù)。
  比較dsbE-PCR、omlA-PCR和ApxIVA-PCR的敏感性和特異性,并同時(shí)運(yùn)用三種PCR方法檢測(cè)135份母豬鼻腔棉拭子中APP核酸,比較三種PCR方法的APP核酸檢出率。結(jié)果顯示:三種PCR最低檢測(cè)限度均為102CFU,且至對(duì)APP發(fā)生反應(yīng);ds

4、bE-PCR方法的APP核酸檢出率(23.7%)顯著高于omlA-PCR(8.1%)和ApxIVA-PCR(14.8%),三者符合率較高,分別為84.4%、91.1%和93.3%。本試驗(yàn)為APP亞臨床感染分子檢測(cè)方法的改良提供參考。
  同時(shí)使用添加抗生素、NAD及血清的mPPLO、TSA、CA和BA四種選擇性培養(yǎng)基分離135份母豬鼻腔棉拭子中APP,比較四種分離培養(yǎng)基的分離率。結(jié)果顯示:mPPLO的APP分離率(11.9%)顯著

5、高于TSA(0.7%)、CA(5.2%)和BA(2.2%),四者符合率較高,分別為88.9%、93.3%、90.37%、95.6%、98.5%和97.0%。本試驗(yàn)為豬鼻腔中APP分離方法的優(yōu)化及培養(yǎng)基的選擇提供理論參考。
  通過(guò)細(xì)菌學(xué)試驗(yàn),研究APP分離株和參考株的生化特性。結(jié)果顯示:分離株和參考菌株的細(xì)菌形態(tài)、生化特性以及生長(zhǎng)曲線(xiàn)一致。G-,具有典型的多形性,菌體較小,多為球桿菌;與甘露醇、葡萄糖等反應(yīng)為陽(yáng)性,與乳糖、七葉苷等

6、反應(yīng)為陰性;2h~12h期間處于對(duì)數(shù)期,12h~14h達(dá)到最大值,14h后稍有下降并趨于平穩(wěn)。本試驗(yàn)結(jié)果為APP的細(xì)菌學(xué)檢測(cè)、生化鑒定及疫苗制作提供參考依據(jù)。
  運(yùn)用常規(guī)藥敏紙片法,研究APP分離株藥物敏感性。結(jié)果顯示:安徽分離株對(duì)環(huán)丙沙星,氟苯尼考和諾氟沙星的敏感率最高(100%),其次是阿奇霉素和復(fù)方新諾明(85.7%),對(duì)丁胺卡那、青霉素等較敏感(71.4%~42.9%),對(duì)四環(huán)素、阿莫西林、萬(wàn)古霉素和林可霉素耐藥(0%)

7、;福建分離株對(duì)環(huán)丙沙星和氨芐西林的敏感率最高(88.9%);其次是諾氟沙星、卡那霉素和頭孢唑林(77.8%),對(duì)青霉素、氟苯尼考等較敏感(66.7%~33.3%),對(duì)四環(huán)素、林可霉素和萬(wàn)古霉素耐藥(0%)。本試驗(yàn)為APP臨床用藥提供指導(dǎo)。
  通過(guò)輔酶試驗(yàn),鑒定APP的生物型。結(jié)果顯示:安徽分離株及參考菌株屬于生物I型,福建分離株屬于生物II型;運(yùn)用ApaI-PFGE技術(shù),對(duì)APP分離株及參考株進(jìn)行基因型分型。結(jié)果顯示:參考株和分

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