1、隨著社會進步和生活水平的提高，人們對健康要求越來越高。我們知道，生物大分子參與許多重要的生物過程。一些生物大分子的改變可能預示著某些生理過程不可逆地轉變或疾病的發(fā)生，同時，影響健康的還有環(huán)境因素，尤其是環(huán)境中重金屬對人具有極強的危害作用，即使是以痕量形式存在。因此，對于生物分子和環(huán)境重金屬的檢測在疾病診斷，環(huán)境安全等民生領域具有極為重要的意義。目前，Toe hold介導的鏈置換技術因其操作簡便，成本適中，在生物計算機和生物分子檢測中受到

2、極大關注；而銀納米簇合成技術因其高的量子產(chǎn)率和良好的光穩(wěn)定性，在新材料合成及樣品分析中顯得越來越重要?；诖?，本論文利用To e ho ld介導的鏈置換和銀納米簇技術，研制新型生物大分子和重金屬檢測體系并進行了初步應用研究。具體工作如下：
　　1、建立了To e ho ld介導的鏈置換-微球捕獲的點突變熒光檢測方法。許多遺傳性疾病的發(fā)生發(fā)展與點突變密切相關，點突變的準確檢測對這些疾病的預防、臨床檢測和分子診斷有重大意義。目前基于熒

3、光偏正等技術的To e ho ld介導鏈置換方法能快速實現(xiàn)點突變檢測，但是需要昂貴的熒光偏正等檢測系統(tǒng)。本論文基于To e ho ld介導的鏈置換技術和微球介導的捕獲技術，設計了一種新的檢測體系，實現(xiàn)了點突變準確快速的研究。該方法能對各種點突變類型進行檢測，而且操作簡便，不需要昂貴儀器，也不需要電泳、離心、分離、加酶等復雜繁瑣的步驟，有望在臨床檢測和應用上發(fā)揮重要作用。
　　2、建立了基于G-rich的銀納米簇信號放大的核酸外切酶

4、(Exo nuc lease I)的檢測方法。Exonuc lease I酶從核苷酸鏈的一端開始逐個水解核苷酸，在分析核酸的結構差異，測定基因組 DN A中的特定位點及某些重要的生物過程中具有重要意義。傳統(tǒng)檢測酶的凝膠電泳、比色法、放射性標記法以及酶聯(lián)免疫吸附沉淀法等方法，往往需要復雜操作過程或昂貴設備。本論文基于G-r ic h能極大增強銀納米簇熒光信號的特點，建立了一種新型的酶檢測體系，實現(xiàn)Exonuc lease I的快速靈敏檢測

5、。該方法的靈敏度為0.05U/mL，而且具有較好的檢測特異性，不需要復雜繁瑣的操作和昂貴的儀器設備，為蛋白質酶的分析研究提供了一種好的檢測策略，同時為酶活性的抑制劑篩選提供了一種有效的方法。
　　3、建立了To e ho ld介導鏈置換-銀納米簇的汞離子檢測方法。汞離子對于人類的健康和環(huán)境有著嚴重危害，檢測環(huán)境中汞離子的含量對于人類生態(tài)治理、污水排放、工業(yè)和生活用水等各方面都有著重要意義。傳統(tǒng)的汞離子主要是基于光譜或質譜的檢測方法