1、第一部分：尼克酰胺抑制PKC-βⅡ活性改善高糖導致的心肌微血管內皮細胞血管形成障礙
　　目的：探討尼克酰胺對高糖導致的微血管生成障礙的影響及可能機制。
　　方法：分離培養(yǎng)原代心肌微血管內皮細胞，取第2代細胞進行實驗，分為正常糖組（NG，5.6 mmol/L）、高糖組（HG，33.3 mmol/L）、高糖+尼克酰胺組(HG+N，33.3 mmol/L+20 mmol)和高糖+ PKC-βⅡ抑制劑 LY333531組(HG+LY

2、，33.3 mmol/L+20 nmol)，培養(yǎng)24小時后，通過Matrigel，Transwell和CCK-8試驗分別觀察細胞的管腔形成、遷移及增殖情況。Western blot檢測細胞蛋白激酶C-βII（protein kinase C-βII，PKC-βII）、磷酸化 PKC-βII(Thr641)、蛋白激酶 B（Akt）、磷酸化 Akt（Ser473）（p-Akt）、內皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric ox

3、ide syntheses，eNOS)和磷酸化 eNOS（Ser1117）（p-eNOS）蛋白的表達情況。
　　結果：與NG組相比，HG組細胞的管腔形成、遷移和增殖能力明顯降低（P均<0.05）；而與 HG組相比，HG+N組和HG+LY組細胞的管腔形成、遷移和增殖能力均得到明顯改善（P均<0.05）。Western blot結果顯示：與NG組相比，HG組 PKC-βⅡ磷酸化程度上調，并伴隨 Akt及 eNOS磷酸化水平降低（P均<

4、0.05）。Nicotinamide抑制了高糖導致的PKC-βⅡ磷酸化程度上調，并恢復Akt、eNOS磷酸化至NG組水平（P<0.05）。
　　結論：尼克酰胺可以改善高糖導致的心肌微血管內皮細胞血管形成障礙，其機制可能與抑制PKC-βⅡ的磷酸化，進而上調Akt/eNOS通路活性有關。
　　第二部分：尼克酰胺對糖尿病大鼠心肌梗死后微血管形成及心功能的影響
　　目的：探討尼克酰胺對糖尿病大鼠心肌梗死后微血管形成及心功能的影

5、響。
　　方法：腹腔注射鏈脲佐菌素50mg/kg制作1型糖尿病大鼠模型，將血糖達標的大鼠通過結扎冠狀動脈左前降支的方法制備糖尿病大鼠心肌梗死模型。將存活的大鼠隨機分組：心肌梗死組（MI，n=18）和尼克酰胺組（NIC，n=18），另設假手術組（sham，n=18），假手術組只在心臟相同位置穿線但不結扎。心肌梗死24小時后，NIC組給予尼克酰胺40mg/(kg·d)灌胃，MI組和假手術組給予相同體積的生理鹽水替代，連續(xù)灌胃28天。心

6、肌梗死28天后行心臟超聲檢查、Masson染色、免疫組化及Western blot檢測。
　　結果：心肌梗死28天后，與sham組相比，MI組收縮期室間隔厚度（IVSs）和舒張期室間隔厚度（IVSd）明顯減小，左室收縮末內徑（LVIDs）和左室舒張末內徑（LVIDd）明顯增大，左室射血分數（LVEF）和縮短分數（FS）明顯減少（P均<0.05）。與 MI組相比，NIC組上述指標均明顯改善（P均<0.05），并且大鼠心肌梗死面積顯著

7、減少，心肌梗死周圍區(qū)微血管密度及 VEGF表達明顯增加（P均<0.05）。Western blot結果顯示：與sham組相比，MI組PKC-βⅡ磷酸化程度上調，且伴隨 Aktser473及 eNOSser1117磷酸化水平降低（P均<0.05）。與MI組相比，NIC組PKC-βⅡ磷酸化水平減少，并且Aktser473及eNOSser1117磷酸化水平增加（P均<0.05）。
　　結論：尼克酰胺可以促進糖尿病大鼠心肌梗死后的微血管形