1、研究目的：
　　通過對注射用重組人TNK組織型纖溶酶原激活劑（Recombinant Human TNK Tissue-type Plasminogen Activator for Injection，簡稱rhTNK-tPA）凍干粉針劑關鍵生產(chǎn)工序真空冷凍干燥工藝（以下簡稱“凍干工藝”）的放大生產(chǎn)研究，建立符合2010版《藥品生產(chǎn)質量管理規(guī)范》（Good Manufacture Practice，簡稱GMP），以及生物制品上市注冊

2、要求的生產(chǎn)工藝，并為同類生物制品的凍干工藝放大提供示范和參考。
　　研究內容:
　　采用的材料是rhTNK-tPA原液，具體方法如下：
　　1)按照相關法規(guī)，根據(jù)原液濃度（蛋白質含量）、西林瓶容積及合適的藥液凍干厚度來確定分裝量。
　　2)利用共晶點測試儀測試藥液的共晶點和共熔點，根據(jù)測試結果，在中試凍干曲線的基礎上調整生產(chǎn)凍干曲線；
　　3)確認凍干機符合GMP要求并滿足工藝需要；
　　4)用調整的

3、凍干曲線進行凍干工藝的放大研究，主要從設定溫度和真空度、預凍最低溫度和降溫速率、升華溫度和升華速率等方面進行優(yōu)化，生產(chǎn)出符合rhTNK-tPA成品放行標準的產(chǎn)品。工藝確定后通過至少3批生產(chǎn)驗證來確認工藝的穩(wěn)定性和可控性。
　　研究結果:
　　1)制劑組分及分裝量：rhTNK-tPA為主藥，藥液分裝量約為3.2ml，蛋白質濃度為5.33mg/ml，L-精氨酸和聚山梨酯80為凍干保護劑，磷酸為pH調節(jié)劑。
　　2)根據(jù)4批

4、次藥液共10次共晶點和共熔點的測定，確定藥液的共晶點或共晶區(qū)為-8℃～-12℃，固化的穩(wěn)定溫度約在-18～-24℃，共熔點為-4℃。
　　3)凍干工藝摸索：通過3批緩沖液試機、5批摸索優(yōu)化凍干試驗，根據(jù)藥液分裝厚度延長預凍時間和升華時間，不斷進行凍干參數(shù)調整，基本確定凍干曲線。接著通過2批試生產(chǎn)，各階段制品溫度穩(wěn)定，凍干工藝相對穩(wěn)定。
　　4)凍干工藝驗證：通過5批連續(xù)工藝驗證，驗證結果顯示凍干工藝基本穩(wěn)定。5批工藝驗證的凍

5、干總用時為48～53h，其中預凍階段用時6～8h，升華干燥階段用時29～33.5h，解吸干燥階段用時9.5～12.5h。
　　5)工藝再驗證：用經(jīng)工藝驗證的凍干工藝生產(chǎn)國家藥監(jiān)局注冊和GMP現(xiàn)場檢查批共9批次，成品的所有檢測項目均符合注冊標準，表明在現(xiàn)有的生產(chǎn)環(huán)境和工藝條件下，能持續(xù)穩(wěn)定地生產(chǎn)出符合質量標準的產(chǎn)品。
　　6)成品批次放行檢定：rhTNK-tPA成品檢定項目主要包括理化（外觀、復溶時間、可見異物、裝量差異、不溶