1、合浦珠母貝（Pinctada fucata）亦稱為馬氏珠母貝，廣泛分布于熱帶與亞熱帶沿海地區(qū)，是我國重要的海水養(yǎng)殖貝類。珠母貝貝殼的結構可分為三層，從外到內分別是角質層、棱柱層、珍珠層。貝殼珍珠層和天然珍珠的顯微結構及化學組成基本相同，均由95％以上的文石型碳酸鈣和低于5％的有機質組成。本論文以合浦珠母貝珍珠層粉作為研究對象，研究了珍珠層可溶性蛋白的提取與純化工藝、酪氨酸酶抑制活性及其在化妝品中的應用，具體研究內容如下:
　　(1

2、)以合浦珠母貝珍珠層粉為原料，采用水溶液浸提法提取珍珠層粉中的可溶性蛋白。以提取率作為衡量指標，對提取液中NaCl的質量濃度、提取時間、溶液pH值、提取溫度、料液比進行了單因素和響應面優(yōu)化實驗，確定了珍珠層可溶性蛋白的最佳提取工藝參數為:以0.2％NaCl溶液為提取溶劑，料液比為1∶6，溶液pH值為9，25℃恒溫攪拌15h。采用優(yōu)化后的工藝參數提取珍珠層可溶性蛋白，其得率為74.64％。
　　(2)以蛋白粗提液為原料，采用聚乙二醇

3、(PEG)/硫酸鈉(Na2SO4)雙水相體系純化珍珠層可溶性蛋白。以蛋白回收率作為衡量指標，對雙水相體系中的PEG平均分子量、PEG質量分數、Na2SO4的質量分數、離子強度、蛋白粗提液加入量進行了單因素和響應面優(yōu)化實驗，確定了珍珠層可溶性蛋白的最佳純化工藝參數為:10 g的雙水相體系中，PEG2000、Na2SO4、KCl的質量分數分別為30％、6％、1％，蛋白粗提液加入量為2mL。采用優(yōu)化后的工藝參數純化珍珠層可溶性蛋白，其得率為9

4、2.48％。
　　(3)研究了珍珠層可溶性蛋白對酪氨酸酶單酚酶和二酚酶活力的抑制作用、抑制類型及抑制機理。實驗結果表明，該蛋白對酪氨酸酶單酚酶和二酚酶活力均有良好的抑制效果，且樣品濃度與酶活力之間存在劑量依賴關系，對兩者的半抑制濃度分別為26.01 mg/mL和14.64 mg/mL。珍珠層可溶性蛋白能顯著延長酪氨酸酶單酚酶催化反應的遲滯時間;對二酚酶的抑制類型為可逆抑制，抑制機理是競爭性抑制，米氏常數Km和抑制常數分別為0.21

5、 mg/mL和3.360 mg/mL。
　　(4)探索了珍珠層可溶性蛋白在化妝品中的應用，利用乳化法制備出一種水包油(O/W)型膏霜類美白護膚品，并對該美白護膚霜的穩(wěn)定性、理化指標和衛(wèi)生狀況進行了綜合評價。實驗結果表明，該護膚霜外觀穩(wěn)定均一，pH值(6.4)接近人體皮膚表面酸堿度，重金屬含量、菌落總數、霉菌和酵母菌總數均符合標準，證明產品的感官指標、理化指標及衛(wèi)生指標均達到了《化妝品安全技術規(guī)范》(2015年版)和QB/T1857